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典型文献
鸭疫里默氏杆菌Porin蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立与应用
文献摘要:
旨在建立一种新型可适用于鸭疫里默氏杆菌(RA)病抗体检测的间接ELISA方法.以血清2型RA贵州分离株为研究对象,将其微孔蛋白Proin编码的基因克隆至pET-32a载体,构建重组表达质粒pET-32a-porin,在E.coli BL21(DE3)中使用IPTG诱导后表达.以纯化后的Porin蛋白作为包被抗原,通过一系列条件的优化建立一种检测RA抗体的间接ELISA方法,对其性能进行综合评价.结果显示,该方法具有较好的敏感性、重复性及特异性,阳性血清经1∶6 400稀释后检测结果仍为阳性,批内变异系数(CV)在1.27%~4.90%之间,批间CV在2.59%~5.43%之间,该方法可特异性地检测出抗RA抗体,与禽流感病毒(AIV)H5亚型、AIV H7亚型、新城疫病毒(NDV)、鸭圆环病毒(DuCV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)及E.coli阳性血清均无交叉反应,与商品化ELISA抗体试剂盒检测相比,两者符合率为97.26%.使用建立的ELISA方法对临床采集的801份样品血清开展抗体检测分析(626份为已免疫鸭传染性浆膜炎二价灭活疫苗"血清1型+血清2型"的样品血清,175份为未免疫任何鸭传染性浆膜炎疫苗的样品血清),有564份为免疫抗体阳性,检出阳性率为90.01%(564/626),有36份为感染抗体阳性,检出阳性率为20.99%(36/175).结果表明,本研究建立了一种新型可用于RA抗体检测的间接ELISA方法,为RA的血清学流行病学调查提供了新的检测方法.
文献关键词:
鸭疫里默氏杆菌;Porin蛋白;ELISA
作者姓名:
包涛涛;鲜思美;顾庆林;杨倩;梁倩;杨先富;吴通奎;王正文;廖飞
作者机构:
贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州省黔东南州农业农村局,贵州黔东南556000;贵州省动物疫病研究所,贵州贵阳550025;贵州农业职业学院,贵州贵阳550000
文献出处:
引用格式:
[1]包涛涛;鲜思美;顾庆林;杨倩;梁倩;杨先富;吴通奎;王正文;廖飞-.鸭疫里默氏杆菌Porin蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立与应用)[J].中国兽医学报,2022(09):1830-1837
A类:
Porin,Proin,porin
B类:
鸭疫里默氏杆菌,原核表达,其间,建立与应用,RA,抗体检测,分离株,微孔,基因克隆,pET,32a,重组表达,质粒,coli,BL21,DE3,IPTG,包被抗原,阳性血清,禽流感病毒,AIV,H5,H7,新城疫病毒,NDV,鸭圆环病毒,DuCV,鸭坦布苏病毒,DTMUV,交叉反应,商品化,试剂盒,符合率,检测分析,传染性浆膜炎,二价,灭活疫苗,未免,免疫抗体,体阳,检出阳性率,感染抗体,血清学,流行病学调查
AB值:
0.339063
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