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MDCK细胞流感疫苗层析工艺的建立
文献摘要：
目的 建立MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺.方法 采用Cellufine Sulfate亲和层析柱纯化MDCK细胞流感病毒液,并对洗脱缓冲液盐浓度(0.5、1、1.5 mol/L NaCl)、线性流速(50、100、150 cm/h)及样品浓缩倍数(1、2、5倍)进行优化.采用优化方法连续上样40个柱体积,计算亲和层析结合HA的动态结合载量.采用优化方法检测3批MDCK细胞流感病毒液血凝素(hemagglatinin,HA)含量、宿主DNA残留量和宿主蛋白残留量,并计算HA回收率、宿主DNA去除率及宿主蛋白去除率.同时采用优化方法及分子筛层析Sepharose 4FF纯化同批MDCK细胞流感病毒液,比较纯化效果.结果 最佳洗脱缓冲液盐浓度为1.5 mol/L NaCl,线性流速为100 cm/h,样品浓缩倍数为5倍.最佳条件下纯化产物HA回收率为80％,宿主DNA去除率为99％,宿主蛋白去除率达80％以上.亲和层析结合HA的动态结合载量为2 072 μg/mL介质.与分子筛层析Sepharose 4FF比较,Cellufine Sulfate亲和层析纯化样品HA回收率及DNA去除率均有提高,宿主蛋白去除率略有下降.结论 建立的MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺具有较高的杂质去除率,为细胞流感疫苗大规模纯化奠定了基础.
文献关键词：
流感病毒;MDCK细胞;亲和层析
中图分类号：
作者姓名：
杨越;李雪娇;郭骐源;郭丹丹;郭轩麟;吴业红
作者机构：
长春生物制品研究所有限责任公司,吉林长春130012
文献出处：
引用格式：
[1]杨越;李雪娇;郭骐源;郭丹丹;郭轩麟;吴业红-.MDCK细胞流感疫苗层析工艺的建立)[J].中国生物制品学杂志,2022(08):992-996
A类：
层析工艺,Cellufine,hemagglatinin
B类：
MDCK,流感疫苗,亲和层析,Sulfate,层析柱,流感病毒,毒液,洗脱,缓冲液,盐浓度,NaCl,线性流,浓缩倍数,柱体,HA,载量,血凝素,残留量,宿主蛋白,蛋白残留,去除率,分子筛层析,Sepharose,4FF,最佳条件,纯化产物,层析纯化,杂质去除
AB值：
0.218377
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