典型文献
猪鼻支原体热不稳定延伸因子黏附宿主细胞机制的研究
文献摘要:
为研究热不稳定延伸因子(EF-Tu)在猪鼻支原体(Mhr)与宿主互作中的功能,本研究构建了重组质粒pET-EF-Tu并经PCR鉴定正确后,转化BL21(DE3)大肠杆菌后,通过IPTG诱导表达、镍柱亲和层析纯化获得纯化的重组蛋白rEF-Tu.将重组蛋白免疫家兔制备高免血清,采用ELISA方法检测其效价.利用该免疫血清通过western blot和菌落免疫杂交的方法分析EF-Tu在Mhr表面的表达情况,ELISA结果显示制备的多克隆抗体效价达1:200000以上,且rEF-Tu可表达于Mhr表面;通过间接免疫荧光试验和微孔板黏附试验检测rEF-Tu对猪肾细胞(PK-15)的黏附能力,结果显示rEF-Tu具有黏附能力且该黏附作用具有剂量依赖性;进一步利用微孔板的方法检测rEF-Tu蛋白结合于纤溶酶原和细胞外基质成分的能力,结果表明rEF-Tu蛋白可结合于宿主纤溶酶原以及不同的细胞外基质成分(纤连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白和玻连蛋白).本研究结果表明EF-Tu可于Mhr表面表达、可黏附宿主细胞,并可结合纤溶酶原和多种细胞外基质成分,在Mhr的感染及致病中可能具有重要功能.
文献关键词:
猪鼻支原体;热不稳定延伸因子;黏附;纤溶酶原;细胞外基质
中图分类号:
作者姓名:
李瑶;王佳;邵佳;于岩飞;袁厅;刘蓓蓓;冯志新;邵国青;屠志刚;熊祺琰
作者机构:
江苏大学生命科学学院,江苏 镇江 212013;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏 南京 210014;南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210014;江苏大学食品与生物工程学院,江苏 镇江 212013
文献出处:
引用格式:
[1]李瑶;王佳;邵佳;于岩飞;袁厅;刘蓓蓓;冯志新;邵国青;屠志刚;熊祺琰-.猪鼻支原体热不稳定延伸因子黏附宿主细胞机制的研究)[J].中国预防兽医学报,2022(09):990-995
A类:
热不稳定延伸因子,Mhr,rEF
B类:
猪鼻支原体,体热,宿主,主细胞,Tu,研究构建,重组质粒,pET,BL21,DE3,大肠杆菌,IPTG,诱导表达,亲和层析,层析纯化,重组蛋白,家兔,高免血清,免疫血清,清通,western,blot,菌落,多克隆抗体,抗体效价,间接免疫荧光试验,微孔板,试验检测,猪肾细胞,PK,黏附能力,黏附作用,剂量依赖,量依赖性,利用微,蛋白结合,纤溶酶原,细胞外基质,质成,原以,纤连蛋白,层粘连蛋白,胶原蛋白,玻连蛋白,可于,合纤,重要功能
AB值:
0.263393
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