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抗汉城病毒荧光单克隆抗体的制备及初步应用
文献摘要：
目的:制备抗汉城病毒(Seoul virus，SEOV)荧光单克隆抗体(单抗)，并初步应用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液的病毒灭活验证。方法:以SEOV L-99株灭活病毒原液为免疫原，采用小鼠杂交瘤细胞融合技术，筛选抗SEOV特异性单抗杂交瘤；小鼠体内诱生法制备单抗腹水，蛋白A亲和层析纯化单抗，并以蛋白质印迹法鉴定其特异性；间接ELISA测定单抗效价和相对亲和力；纯化单抗采用搅拌法标记异硫氰酸荧光素，并分别采用直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法对Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行病毒灭活验证。结果:共筛选出4株特异性抗SEOV L-99株杂交瘤1D5、2E3、3A4及5B7。蛋白质印迹法鉴定4株单抗均与SEOV L-99株核衣壳蛋白发生特异性反应；间接ELISA测定腹水效价为3.13×10
－8~1.25×10
－7；相对亲和力顺序为1D5>3A4>2E3>5B7；纯化抗体纯度>95%；异硫氰酸荧光素标记1D5株单抗的结合比率为3.4；直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法检测盲传3代的Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液，病毒灭活验证结果一致。
结论:成功筛选到高效价特异性抗SEOV单抗，并制备成荧光单抗，可用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗生产工艺中的病毒灭活验证。
文献关键词：
肾综合征出血热;汉城病毒;荧光单克隆抗体;灭活验证
中图分类号：
作者姓名：
张雨薇;彭言峰;刘双军;陈子杨;韩德明;李景良;常军亮
作者机构：
长春生物制品研究所有限责任公司生物技术研究室，长春 130012;长春理工大学生命科学技术学院生物工程系，长春 130022
文献出处：
引用格式：
[1]张雨薇;彭言峰;刘双军;陈子杨;韩德明;李景良;常军亮-.抗汉城病毒荧光单克隆抗体的制备及初步应用)[J].国际生物制品学杂志,2022(04):181-186
A类：
荧光单克隆抗体,灭活验证,2E3,5B7
B类：
汉城病毒,单克隆抗体的制备,初步应用,Seoul,virus,SEOV,单抗,肾综合征出血热,热灭活,灭活疫苗,原液,病毒灭活,活病毒,免疫原,杂交瘤细胞,细胞融合,融合技术,腹水,亲和层析,层析纯化,蛋白质印迹法,定单,效价,亲和力,搅拌法,异硫氰酸荧光素,直接免疫荧光法,内接,1D5,3A4,核衣壳蛋白,白发,水效,10
,荧光素标记,盲传,疫苗生产
AB值：
0.2035
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