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猪肺炎支原体融合蛋白MHP-P46-P36的表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
文献摘要：
利用生物学软件分析猪肺炎支原体P46蛋白和P36蛋白的抗原决定簇,将抗原表位富集区进行串联,表达融合蛋白MHP-P46-P36.以融合蛋白MHP-P46-P36作为包被抗原,优化反应条件建立肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法.结果显示:融合蛋白MHP-P46-P36以可溶性形式高效表达;ELISA检测方法的最适抗原包被质量浓度10 mg/L,1％BSA封闭60 min,一抗最佳稀释度1∶ 40且37℃60 min,二抗最佳稀释度1∶ 4 000且37℃60 min,最适显色时长15 min,cut-off值为D450 nm=0.385;与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪鼻支原体、猪絮状支原体、猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性;阴阳性血清的组内和组间变异系数均小于7％,具有较好重复性;52个样品临床样本检测结果显示,建立的ELISA方法与IDEXX猪肺炎支原体抗体检测试剂盒相比,阳性样本的符合率为83.09％.
文献关键词：
猪肺炎支原体;融合蛋白;间接ELISA
中图分类号：
作者姓名：
李书光;张娣;赵家磊;杨立芳;李峰;沈志强;李同斌
作者机构：
山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州265200;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州265200;青岛农业大学,山东 青岛256600;无棣县畜牧兽医服务中心,山东无棣251900
文献出处：
引用格式：
[1]李书光;张娣;赵家磊;杨立芳;李峰;沈志强;李同斌-.猪肺炎支原体融合蛋白MHP-P46-P36的表达及间接ELISA抗体检测方法的建立)[J].中国兽医学报,2022(07):1376-1381
A类：
P46,D450
B类：
猪肺炎支原体,融合蛋白,MHP,P36,利用生物,抗原决定簇,抗原表位,富集区,包被抗原,优化反应,反应条件,高效表达,BSA,显色,cut,off,猪瘟病毒,猪伪狂犬病病毒,猪鼻支原体,絮状,猪蓝耳病病毒,猪圆环病毒,病毒阳性,阳性血清,交叉反应,阴阳,组间变异,临床样本,IDEXX,肺炎支原体抗体检测,检测试剂盒,阳性样本,符合率
AB值：
0.2586
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