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典型文献
3种不同植物来源的tHMGR对于酿酒酵母MVA代谢流通量的比较研究
文献摘要:
该研究对来自甘草Glycyrrhiza uralensis、黄花蒿Artemisia annua和拟南芥Arabidopsis thaliana的HMGR基因编码蛋白分别进行生物信息学分析,发现GuHMGR和AaHMGR蛋白各包含2个跨膜区,AtHMGR蛋白具有3个跨膜区.且GuHMGR、AaHMGR和AtHMGR3个蛋白均具有HMGR催化作用的活性中心结构域.将甘草、黄花蒿和拟南芥的3个截短HMGR基因(tHMGRs)连接到 pYES3载体上,成功构建 pYES3-tGuHMGR、pYES3-tAaHMGR、pYES3-tAtHMGR 质粒.将对照 pYES3质粒和重组质粒pYES3-tGuHMGR、pYES3-tAaHMGR、pYES3-tAtHMGR分别转化酿酒酵母Cen.pk2-1D,成功构建酿酒酵母菌株Y0、Y1、Y2、Y3.挑取阳性单克隆,菌株发酵后通过GC-MS检测其鲨烯、羊毛甾醇、麦角固醇的含量.采用实时荧光定量PCR检测tGuHMGR、tAaHMGR、tAtHMGR分别在菌株Y1、Y2、Y3中的相对表达情况.结果显示,过表达tAaHMGR的菌株,其鲨烯的产量以及萜类前体物质鲨烯、麦角固醇和羊毛甾醇的总产量都是最高的.实时荧光定量PCR结果发现,tAaHMGR在菌株中的相对表达量比tGuHMGR高,与菌株发酵结果一致.该研究通过比较3种不同植物来源的tHMGR对于酿酒酵母MVA途径代谢通量的影响,挑选出一个较优的tHMGR,可为今后构建酿酒酵母底盘细胞,在提高其鲨烯及萜类前体物质积累的优势基因选择上提供一些参考.
文献关键词:
截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶;MVA;鲨烯;酿酒酵母
作者姓名:
张晓丽;晁二昆;孙梦楚;赵宏飞;王彩霞;张柏林
作者机构:
北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083;中国中医科学院中药研究所,北京100700;曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜273165
文献出处:
引用格式:
[1]张晓丽;晁二昆;孙梦楚;赵宏飞;王彩霞;张柏林-.3种不同植物来源的tHMGR对于酿酒酵母MVA代谢流通量的比较研究)[J].中国中药杂志,2022(10):2614-2622
A类:
tHMGR,GuHMGR,AaHMGR,AtHMGR,AtHMGR3,tHMGRs,pYES3,tGuHMGR,tAaHMGR,tAtHMGR,pk2
B类:
不同植物,植物来源,MVA,代谢流,流通量,自甘,甘草,Glycyrrhiza,uralensis,黄花蒿,Artemisia,annua,拟南芥,Arabidopsis,thaliana,基因编码,编码蛋白,生物信息学分析,催化作用,活性中心,中心结构,结构域,接到,重组质粒,Cen,1D,酿酒酵母菌,酵母菌株,Y0,Y1,Y2,Y3,单克隆,鲨烯,羊毛,甾醇,麦角固醇,过表达,萜类,前体物质,醇和,总产量,相对表达量,代谢通量,挑选出,底盘细胞,物质积累,基因选择,辅酶,还原酶
AB值:
0.264803
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