典型文献
猪δ冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
文献摘要：
以大肠杆菌表达系统表达的猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)截短抗原S1-CTD蛋白作为包被抗原,建立能够检测血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法.以本实验室分离保存的PDCoV流行株CH/XJYN/2016(MN064712)的S基因为模板设计合成特异性引物,通过RT-PCR扩增出S基因抗原表位区S1-CTD(877～1 299 bp),构建原核表达载体pET24a-S1-CTD,经IPTG诱导表达重组蛋白S1-CTD,纯化后作为包被抗原建立了检测PDCoV特异性IgA抗体的间接ELISA方法.结果显示,抗原最佳包被质量浓度为8 mg/L,血清和酶标二抗最佳稀释比例为1 ∶10和1 ∶5 000;S/P≥0.489判定为阳性,S/P＜0.489判定为阴性.该方法与猪流行性腹泻病毒、猪嵴病病毒、口蹄疫病毒及猪瘟病毒的标准阳性血清均无交叉反应,特异性良好;批内和批间变异系数均小于10％,具有较好的重复性.间接ELISA检查方法的建立为PDCoV的血清学调查及免疫效果评价提供了有效的检测手段,为进一步开发临床检测试剂盒奠定基础.
文献关键词：
猪δ冠状病毒;S1-CTD蛋白;间接ELISA;IgA抗体
中图分类号：
作者姓名：
尚再卓;于瑞明;张莉萍;王永录;潘丽;杜晓华;刘霞;刘新生
作者机构：
甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃兰州730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730030;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070
文献出处：
引用格式：
[1]尚再卓;于瑞明;张莉萍;王永录;潘丽;杜晓华;刘霞;刘新生-.猪δ冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立)[J].中国兽医学报,2022(12):2339-2346
A类：
XJYN,MN064712
B类：
大肠杆菌表达,表达系统,porcine,deltacoronavirus,PDCoV,S1,CTD,包被抗原,IgA,室分,CH,模板设计,设计合成,特异性引物,抗原表位,bp,原核表达载体,pET24a,IPTG,诱导表达,重组蛋白,稀释比例,猪流行性腹泻病毒,口蹄疫病毒,猪瘟病毒,阳性血清,交叉反应,检查方法,立为,血清学调查,免疫效果评价,检测手段,临床检测,检测试剂盒
AB值：
0.324902
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
