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基于N蛋白的牛冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
文献摘要：
为建立牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)抗体间接ELISA检测方法,对BCoV的N基因进行克隆,利用原核表达制备重组N蛋白,以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立ELISA检测方法,并对随机收集的奶牛血清样本进行检测.结果显示,重组N蛋白大小为50 ku,经Western blot鉴定重组N蛋白具有良好的反应原性;建立的ELISA检测方法抗原包被量为1.5μg/mL,血清以1:50稀释,酶标二抗以1:10000稀释,临界值为0.256.用该方法检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、口蹄疫病毒阳性血清均无交叉反应;当BCoV标准阳性血清1:2560稀释时检测结果仍为阳性,灵敏性较好;批内和批间变异系数分别为1.83％～5.80％和2.34％～7.45％.对陕西省部分牛场收集的296份牛血清进行检测,BCoV抗体阳性率为18.24％.建立了一种快速检测BCoV抗体的间接ELISA方法,为BCoV的实验室诊断和流行病学调查提供了技术支持.
文献关键词：
牛冠状病毒;N蛋白;酶联免疫吸附试验
中图分类号：
作者姓名：
李晨露;吴发兴;徐海玲;许信刚;张琪
作者机构：
西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;中国动物卫生与流行病学中心国家动物血清库,山东青岛 266114
文献出处：
引用格式：
[1]李晨露;吴发兴;徐海玲;许信刚;张琪-.基于N蛋白的牛冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用)[J].动物医学进展,2022(05):1-5
A类：
B类：
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AB值：
0.299412
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