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典型文献
抗非洲猪瘟病毒噬菌体展示单克隆抗体的筛选及表达
文献摘要:
为构建抗非洲猪瘟病毒(ASFV)噬菌体单链抗体文库,并获得抗ASFV的单链抗体,本试验利用自然感染AS-FV猪的外周血淋巴细胞提取的mRNA,反转录获得cDNA后分别扩增出猪IgG抗体重链和轻链的可变区基因,构建scFv单链抗体后连接至pComb3XSS载体,构建噬菌体抗体展示文库,经过3轮"吸附、洗脱、富集"的筛淘过程,成功获得1株能够与ASFV蛋白特异性结合的抗体,并验证了该抗体的反应能力.根据筛选得到的可变区序列构建完整抗体使用HEK293A细胞进行真核表达与验证.结果 表明,成功构建了库容量约为9.2×1011 PFU/mL抗ASFV噬菌体单链抗体文库,筛选并得到1株与ASFV病毒蛋白亲和性较高的单链抗体,使用真核表达系统成功表达了该株重组抗体.该研究为ASFV的诊断和治疗奠定了一定基础.
文献关键词:
非洲猪瘟病毒;单链抗体;噬菌体抗体文库;真核表达
作者姓名:
周昊;胡永新;常星;孙举;仝舟;毕玉海;吴晓东;尹燕博
作者机构:
青岛农业大学动物医学院,山东青岛266109;中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032;青岛博隆基因生物工程有限公司,山东青岛266041;中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生与免疫学重点实验室,北京100101
文献出处:
引用格式:
[1]周昊;胡永新;常星;孙举;仝舟;毕玉海;吴晓东;尹燕博-.抗非洲猪瘟病毒噬菌体展示单克隆抗体的筛选及表达)[J].中国兽医学报,2022(01):6-11
A类:
pComb3XSS,噬菌体抗体文库
B类:
抗非,非洲猪瘟病毒,噬菌体展示,单克隆抗体,ASFV,单链抗体,自然感染,外周血淋巴细胞,细胞提取,cDNA,IgG,轻链,可变区,scFv,洗脱,特异性结合,反应能力,选得,HEK293A,真核表达,库容量,PFU,病毒蛋白,亲和性,表达系统,株重,重组抗体,诊断和治疗
AB值:
0.25347
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