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基于重组EP153R蛋白的检测非洲猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法的建立
文献摘要：
为探究非洲猪瘟病毒(ASFV)EP153R蛋白的功能和建立ASFV抗体间接ELISA方法,本试验构建了EP153R蛋白杆状病毒表达系统,采用Western blot与IFA鉴定rEP153R蛋白的表达和免疫原性.结果显示,杆状病毒能高效表达rEP153R蛋白且可被小鼠多克隆抗体识别,具有良好的免疫原性.以此重组蛋白为抗原进行间接ELISA方法的建立,经方阵ELISA确定当抗原包被量2.5μg/mL,ASFV阳性血清稀释比1:1000时为最佳反应条件;以优化后的条件确定了抗体阳性临界值为0.259;特异性试验结果表明,该方法仅与ASFV阳性血清发生反应,具有较强的特异性;重复性试验结果显示变异率小于10％,重复性良好.利用该方法对46份猪血清进行检测,与商品化试剂盒检测结果对比显示,符合率为91.3％,能较好的区分ASFV阴性血清与阳性血清.本研究的结果为后续EP153R功能研究和ASFV临床血清学诊断奠定了基础.
文献关键词：
非洲猪瘟病毒;杆状病毒;EP153R;ELISA
中图分类号：
作者姓名：
程佳;李遥;刘英楠;钟秋萍;史馨瑾;魏常青;谢振华;廖欣欣;宋影影;陈鸿军
作者机构：
山西农业大学动物医学学院,山西030801;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院生物安全研究中心,上海200241
文献出处：
引用格式：
[1]程佳;李遥;刘英楠;钟秋萍;史馨瑾;魏常青;谢振华;廖欣欣;宋影影;陈鸿军-.基于重组EP153R蛋白的检测非洲猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法的建立)[J].中国动物传染病学报,2022(02):74-83
A类：
EP153R,rEP153R
B类：
非洲猪瘟病毒,ASFV,杆状病毒表达系统,blot,IFA,免疫原性,高效表达,多克隆抗体,重组蛋白,行间,经方,方阵,定当,包被,阳性血清,稀释比,反应条件,体阳,重复性试验,猪血,商品化,试剂盒,结果对比,符合率,功能研究,血清学诊断
AB值：
0.229472
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