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典型文献
山羊Notch1基因的表达及细胞定位
文献摘要:
为了进一步了解Notch1蛋白,本研究用BLAST方法对不同动物Notch1基因的同源性及遗传进化情况进行了分析,通过PCR扩增获得Notch1基因,并构建了与GST标签融合表达的原核表达载体、与GFP标签融合表达的真核表达载体.将双酶切和测序鉴定的阳性克隆分别转化BL21感受态细胞和转染BHK21细胞进行原核和真核表达,并用Western blot和荧光显微镜鉴定.同时,与GFP标签对照确定其在细胞中的定位情况.结果 显示,扩增的Notch1基因片段约780 bp,为Notch1基因的部分序列,Notch1在不同动物间的基因序列同源性为94%以上,遗传进化关系上分为3个分支.Western blot检测结果显示,构建的原核表达pGEX-KG-Notch1能够表达预期大小为56 kDa的融合蛋白;荧光显微镜检测显示Notch1与GFP的融合蛋白分布在整个细胞中,但主要集中于细胞核,而GFP空白对照仅分布于细胞质中,说明Notch1主要定位于细胞核中.本研究为进一步探索Notch1与KLP1的相互作用及其功能奠定了基础.
文献关键词:
山羊;Notch1基因;原核表达;细胞定位
作者姓名:
王玉婷;张成;柳璇;高娜;杨勇飞;李有文
作者机构:
塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室/新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室,新疆阿拉尔843300
文献出处:
引用格式:
[1]王玉婷;张成;柳璇;高娜;杨勇飞;李有文-.山羊Notch1基因的表达及细胞定位)[J].中国兽医学报,2022(01):114-119
A类:
KLP1
B类:
山羊,Notch1,细胞定位,BLAST,遗传进化,GST,标签融合,融合表达,原核表达载体,GFP,真核表达载体,双酶,BL21,感受态,转染,BHK21,blot,荧光显微镜,镜鉴,bp,基因序列,序列同源性,进化关系,系上,pGEX,KG,kDa,融合蛋白,显微镜检测,细胞核,空白对照,细胞质
AB值:
0.339369
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