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典型文献
羊口疮病毒LAMP-LFD快速检测方法的建立与初步应用
文献摘要:
根据羊口疮病毒(OrfV)的B2L基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物和1条异硫氰酸荧光素标记的DNA探针,再利用横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物.通过对各反应条件包括反应温度、反应时间、内外引物浓度比、Bst DNA 2.0聚合酶浓度、dNTP Mix浓度、Mg2+浓度以及探针结合温度等优化后,建立了检测OrfV的LAMP-LFD方法.结果显示,LAMP-LFD可特异性检测OrfV,而山羊痘病毒、口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒及丝状支原体山羊亚种等均未检出;LAMP-LFD对OrfV-B2L质粒DNA最低检测浓度为4.95×-2拷贝/μL,其灵敏度是以外引物建立PCR方法的1 000倍.利用PCR和LAMP-LFD检测29份临床样品,两者检出符合率为100%.研究建立的LAMP-LFD检测方法可快速、特异地检测OrfV,可作为早期诊断和检测OrfV的有效手段.
文献关键词:
羊口疮病毒;B2L基因;环介导等温扩增技术;横向流动试纸条
作者姓名:
杨倩;李召仁;鲜思美;包涛涛;张友;梁倩;顾庆林
作者机构:
贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州省动物疫病研究所,贵州贵阳550025;贵州省黔东南州农业农村局,贵州黔东南556000
文献出处:
引用格式:
[1]杨倩;李召仁;鲜思美;包涛涛;张友;梁倩;顾庆林-.羊口疮病毒LAMP-LFD快速检测方法的建立与初步应用)[J].中国兽医学报,2022(03):507-513
A类:
OrfV,横向流动试纸条
B类:
羊口疮病毒,LAMP,LFD,快速检测方法,初步应用,B2L,特异性引物,异硫氰酸荧光素,荧光素标记,扩增产物,反应条件,反应温度,Bst,dNTP,Mix,Mg2+,特异性检测,山羊痘病毒,口蹄疫病毒,小反刍兽疫病毒,丝状支原体山羊亚种,未检,质粒,拷贝,符合率,异地,环介导等温扩增技术
AB值:
0.225804
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