典型文献
双峰驼β-NGF基因的克隆及在生殖轴系的表达
文献摘要：
选取健康的雌性双峰驼(5～6岁)的下丘脑、垂体、卵巢、子宫角和输卵管等组织,通过RT-PCR扩增CDS全序列,并进行生物信息学分析;通过qRT-PCR,免疫组织化学染色技术(immunohistochemistry,IHC)和蛋白免疫印记(Western blot)技术检测β-神经生长因子(β-nerve growth factor,β-NGF)在各组织的表达.结果显示,双峰驼β-NGF基因的CDS区(783 bp)可编码261个氨基酸残基,分子式为C1219H1914N402O365S11,编码的原子个数为3 911,相对分子质量为28.393 74 kDa,理论等电点为9.57,β-NGF编码的为非跨膜可溶性蛋白,其二级结构由a-螺旋、延伸链和无规则卷曲构成,该蛋白有22个丝氨酸磷酸化位点,11个苏氨酸磷酸化位点,2个酪氨酸磷酸化位点;同源性分析显示,双峰驼β-NGF的核苷酸序列与单峰驼、羊驼、野猪、山羊、马、黄牛、人、犬、家鼠及家兔的同源性分别为99.6％,99.0％,92.8％,92.6％,91.7％,91.0％,89.5％,89.1％,84.4％,83.7％;IHC 结果显示,β-NGF 在双峰驼的下丘脑细胞、垂体嗜色细胞和嫌色细胞、卵巢粒细胞、膜细胞和间质细胞、子宫内膜腺上皮细胞和输卵管黏膜上皮细胞均有阳性反应;qRT-PCR结果显示,β-NGF在子宫角中表达量最高,且极显著高于其他组织(P＜0.01);Western blot结果显示,β-NGF蛋白在子宫角中表达量最高,且极显著高于下丘脑和输卵管(P＜0.01),显著高于垂体(P＜0.05).结果表明,本试验成功克隆出双峰驼β-NGF基因的CDS区,其保守性较高,且该蛋白二级结构有3种折叠方式;β-NGF在子宫角表达水平较高,提示β-NGF可能通过子宫内膜参与了双峰驼的诱导排卵过程.
文献关键词：
双峰驼;β-神经生长因子;基因克隆;相对表达
中图分类号：
作者姓名：
王杰;王琪;张勇;南京宏;成力童;赵兴绪
作者机构：
甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070;甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室,甘肃兰州730070
文献出处：
引用格式：
[1]王杰;王琪;张勇;南京宏;成力童;赵兴绪-.双峰驼β-NGF基因的克隆及在生殖轴系的表达)[J].中国兽医学报,2022(11):2242-2249
A类：
C1219H1914N402O365S11
B类：
双峰驼,NGF,生殖轴,轴系,雌性,下丘脑,垂体,子宫角,输卵管,CDS,全序,生物信息学分析,qRT,免疫组织化学染色,化学染色技术,immunohistochemistry,IHC,免疫印,印记,blot,神经生长因子,nerve,growth,bp,可编,氨基酸残基,分子式,相对分子质量,kDa,等电点,可溶性蛋白,无规则,卷曲,丝氨酸,苏氨酸,酪氨酸磷酸化,同源性分析,单峰驼,羊驼,野猪,山羊,黄牛,家鼠,家兔,脑细胞,膜细胞,间质细胞,子宫内膜腺上皮细胞,黏膜上皮,阳性反应,他组织,保守性,蛋白二级结构,折叠,诱导排卵,基因克隆,相对表达
AB值：
0.300978
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