典型文献
羊布鲁菌BtpA和BtpB基因缺失突变载体的构建及生物信息学分析
文献摘要:
为进一步研究布鲁菌IV分泌系统(T4SS)效应蛋白BtpA和BtpB的分子功能,本研究预构建羊布鲁菌BtpA和BtpB基因缺失突变载体,并对其生物学功能进行简单的预测.本研究以羊布鲁菌流行菌株基因组为模板,分别设计了BtpA和BtpB基因上、下游同源臂引物,通过PCR克隆技术得到了待融合基因片段.采用无缝克隆技术(in-fusion cloning),将待融合片段与线性化载体PBK-CMV-SacB连接,经转化、阳性载体的筛选、PCR鉴定及DNA测序验证.并利用生信软件对BtpA和BtpB进行分析.结果表明:PCR鉴定和基因测序显示BtpA和BtpB上、下游基因片段均成功连接到自杀载体上;生信分析显示,BtpA和BtpB序列同源性达99%,不存在信号肽,二级结构以α-螺旋为主,具有良好的反应原性.说明本试验成功构建了羊布鲁菌BtpA和BtpB基因缺失突变载体,并对基因结构和功能进行了预测分析,为下一步研究布鲁菌的致病机制奠定了基础.
文献关键词:
布鲁菌;Ⅳ分泌系统;无缝克隆技术;生信分析
中图分类号:
作者姓名:
乔连江;张萍;周玉成;杨森;杨艳玲
作者机构:
中国农业科学院特产研究所,长春130000
文献出处:
引用格式:
[1]乔连江;张萍;周玉成;杨森;杨艳玲-.羊布鲁菌BtpA和BtpB基因缺失突变载体的构建及生物信息学分析)[J].中国动物传染病学报,2022(06):19-26
A类:
BtpA,BtpB
B类:
布鲁菌,基因缺失,缺失突变,突变载体,生物信息学分析,IV,分泌系统,T4SS,效应蛋白,预构,生物学功能,流行菌株,引物,融合基因,无缝克隆技术,fusion,cloning,线性化,PBK,CMV,SacB,基因测序,接到,自杀,生信分析,序列同源性,信号肽,二级结构,反应原性,基因结构,结构和功能,预测分析,致病机制
AB值:
0.29798
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