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鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法的建立与应用
文献摘要：
为建立一种可以鉴别布鲁菌A19疫苗株和其他布鲁菌的双重荧光定量PCR方法,分别设计特异性扩增布鲁菌BCSP31基因序列和A19疫苗株缺失序列的2套引物探针,对引物和探针浓度进行优化,并对其敏感性、特异性和重复性进行评价.结果表明,用该方法对2种阳性质粒标准品的最低检测限均为10拷贝/μL;该方法扩增A19疫苗株的核酸时只呈现出1条特异性的扩增曲线,扩增其他布鲁菌菌株(包括疫苗株与野毒株)的核酸时,会出现2条特异性的扩增曲线,而非布鲁菌的细菌核酸均未出现特异性的扩增曲线.该方法的批内和批间重复变异系数均小于3％,重复性良好.对122份临床样品的检测结果显示该方法的阳性样品检出率高于套式PCR检测方法和Bruce-Ladder PCR方法,并可对A19疫苗株的核酸进行鉴别.本研究建立的鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,可作为临床上进行A19疫苗株鉴别的一种检测方法.
文献关键词：
布鲁菌;A19疫苗株;荧光定量PCR;鉴别诊断
中图分类号：
作者姓名：
董浩;原霖;刘洋;徐阳;陈亚娜;沈子莹;梁春南
作者机构：
中国食品药品检定研究院,北京102600;中国动物疫病预防控制中心,北京102600
文献出处：
引用格式：
[1]董浩;原霖;刘洋;徐阳;陈亚娜;沈子莹;梁春南-.鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法的建立与应用)[J].中国兽医学报,2022(09):1845-1850
A类：
B类：
布鲁菌,A19,疫苗株,建立与应用,BCSP31,基因序列,失序,引物,物探,质粒,标准品,检测限,拷贝,野毒株,菌核,复变,品检,Bruce,Ladder,法特,灵敏度高,鉴别诊断
AB值：
0.233706
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