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稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系的构建
文献摘要：
为了构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的Marc-145细胞系,以PRRSV全长感染性克隆为模板,通过PCR方法扩增PRRSV N基因,将N基因克隆到慢病毒载体中,获得重组质粒pLenti-CMV-N,利用三质粒慢病毒包装系统转染293T细胞,包装成表达N蛋白的慢病毒颗粒,将慢病毒颗粒转导至Marc-145细胞,用潮霉素B初步筛选阳性细胞,采用终点稀释的方法筛选出稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系.通过的PCR扩增N基因和测序表明细胞系基因组中存在N蛋白编码序列,IFA和Western blot试验验证了N蛋白在细胞系中稳定表达.为此,我们成功获得了稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系.
文献关键词：
PRRSV;N蛋白;细胞系;慢病毒载体
中图分类号：
作者姓名：
任同伟;覃念;全东群;谢欣;王豪;王玉旭;陈樱;欧阳康;黄伟坚;韦祖樟
作者机构：
广西大学动物科学技术学院 动物传染病与分子免疫学实验室,南宁530005
文献出处：
引用格式：
[1]任同伟;覃念;全东群;谢欣;王豪;王玉旭;陈樱;欧阳康;黄伟坚;韦祖樟-.稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系的构建)[J].中国动物传染病学报,2022(01):15-19
A类：
B类：
稳定表达,PRRSV,Marc,细胞系,猪繁殖与呼吸综合征病毒,全长,感染性克隆,基因克隆,慢病毒载体,重组质粒,pLenti,CMV,慢病毒包装,包装系统,转染,293T,装成,慢病毒颗粒,转导,潮霉素,初步筛选,阳性细胞,明细,蛋白编码,编码序列,IFA,blot
AB值：
0.312154
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