典型文献
生物素标记重组猪圆环病毒2d基因型毒株感染性克隆的构建与鉴定
文献摘要：
本试验旨在获得临床上逐渐增多的猪圆环病毒2d基因型毒株(PCV2d),并对其引入生物素标记.首先从陕西咸阳某临床发病猪场采集了 2头发病仔猪和15头未发病仔猪的组织样本,对其进行猪圆环病毒2型(PCV2)检测,并对阳性样本进行测序及序列比对,将获得的PCV2d基因型毒株基因组orf2中226～246 bp序列替换为生物素受体肽(BAP)编码序列并克隆入质粒载体,同时稳定构建表达原核生物素连接酶(BirA)的PK15细胞系,将替换有BAP的PCV2d基因组酶切并环化后转染稳定表达BirA的PK15细胞,连续盲传5代后鉴定获得的重组病毒.结果显示,检测的组织样本中共有5头仔猪的样本为PCV2阳性,其中1份样本为PCV2d基因型,4份样本为PCV2b基因型;在获得BAP序列替换的PCV2d,构建重组质粒T-PCV2d-BAP和稳定表达BirA的PK15细胞系后,将环化的PCV2d-BAP转染稳定表达BirA的PK15细胞并盲传5代,经PCR和Western blot检测均为PCV2阳性,且能被链酶亲和素识别.本试验成功获得的生物素标记重组PCV2d基因型毒株为后续探究PCV2d基因型毒株免疫逃避机制提供一个非常有效的工具.
文献关键词：
猪圆环病毒2型;原核生物素连接酶-生物素受体肽系统;基因型;感染性克隆
中图分类号：
作者姓名：
林小枫;刘梅雪;袁玮艺;张琼歌;朱磊;杜谦
作者机构：
西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;杨凌金海生物技术有限公司,陕西杨凌712100
文献出处：
引用格式：
[1]林小枫;刘梅雪;袁玮艺;张琼歌;朱磊;杜谦-.生物素标记重组猪圆环病毒2d基因型毒株感染性克隆的构建与鉴定)[J].中国兽医杂志,2022(05):16-21,28
A类：
orf2,BirA
B类：
生物素标记,猪圆环病毒,基因型,毒株,感染性克隆,PCV2d,陕西咸阳,临床发病,病猪,猪场,头发,仔猪,阳性样本,序列比对,bp,BAP,编码序列,建表,原核生物,连接酶,PK15,细胞系,换有,环化,转染,稳定表达,盲传,重组病毒,PCV2b,重组质粒,blot,免疫逃避
AB值：
0.240768
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
