典型文献
ANXA2敲除的A549细胞系的构建及其对H1N1和H9N2流感病毒复制的影响
文献摘要：
目的 旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建ANXA2敲除的A549细胞,并探索ANXA2敲除对流感病毒复制的影响.方法 本研究设计了 3对靶向ANXA2基因外显子的特异性sgRNAs,分别将sgRNAs构建到LentiCRISPRv2载体上获得重组质粒,与辅助质粒共转染293T细胞包装成慢病毒后感染A549细胞,通过嘌呤霉素压力及有限稀释法筛选ANXA2基因敲除的单克隆细胞株,用靶基因测序及Western-blot验证ANXA2的敲除效果,并通过CCK-8试验比较ANXA2敲除细胞和野生型A549细胞的细胞活力.再分别用人流感病毒WSN(H1N1)和禽流感病毒SD98(H9N2)感染ANXA2敲除和野生型A549细胞,经TCID50检测ANXA2敲除对流感病毒复制的影响.结果 成功获得了 ANXA2敲除的A549细胞系,且与野生型A549细胞相比,细胞活力无显著差异;ANXA2敲除后WSN(H1N1)和SD98(H9N2)流感病毒的病毒滴度均升高,其中ANXA2对SD98(H9N2)流感病毒的影响要大于WSN(H1N1).结论 本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了 ANXA2敲除的A549细胞,并发现ANXA2敲除促进了流感病毒的复制,本研究为流感病毒复制和致病机制的研究奠定了基础.
文献关键词：
CRISPR/Cas9;膜联蛋白A2;基因敲除;流感病毒
中图分类号：
作者姓名：
刘永宁;马欣傲;吕思莹;李媛;李旭勇;司振书;郭晶;李玉保;刘成
作者机构：
聊城大学农学院,聊城 252000
文献出处：
引用格式：
[1]刘永宁;马欣傲;吕思莹;李媛;李旭勇;司振书;郭晶;李玉保;刘成-.ANXA2敲除的A549细胞系的构建及其对H1N1和H9N2流感病毒复制的影响)[J].中国人兽共患病学报,2022(04):291-296,302
A类：
SD98
B类：
ANXA2,A549,细胞系,H1N1,H9N2,病毒复制,Cas9,基因编辑技术,技术构建,对靶,外显子,sgRNAs,LentiCRISPRv2,重组质粒,共转染,293T,装成,慢病毒,嘌呤霉素,有限稀释,稀释法,基因敲除,单克隆细胞,细胞株,靶基因,基因测序,blot,CCK,野生型,细胞活力,人流,WSN,禽流感病毒,TCID50,病毒滴度,研究利用,致病机制,膜联蛋白
AB值：
0.244038
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