典型文献
Marc-145细胞PKR基因遗传分析与表达
文献摘要:
旨在克隆Marc-145细胞蛋白激酶R(PKR)基因,对其进行遗传特性及表达研究.利用RT-PCR克隆获得Marc-145细胞PKR基因,并对其核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行同源性与遗传进化分析;将该基因分别插入pEGFP-C1与pEGFP-N1多克隆位点,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合真核重组质粒,转染HEK293细胞,通过荧光显微镜观察、Western blot检测EGFP标签,开展PKR融合表达研究.结果显示,成功克隆获得Marc-145细胞PKR基因,编码区为1653 bp,推导编码550个氨基酸,与选取的灵长类及哺乳动物参考物种PKR基因核苷酸序列同源性在72.2%~99.8%之间,氨基酸序列同源性在55.4%~99.5%之间,与豚鼠及其供体物种非洲绿猴(Cercopithecus aethiops)同源性分别为最低、最高;成功构建了EGFP-PKR融合质粒,但荧光蛋白观察及Western blot检测表明,仅C端融合质粒成功表达.结果表明,成功克隆了Marc-145细胞PKR基因并进行了融合表达,为进一步开展猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在感染细胞与细胞内复制增殖时PKR所发挥的作用、PRRSV与细胞固有免疫抗病毒互作机制等研究奠定了基础.
文献关键词:
Marc-145细胞;蛋白激酶R;克隆;序列分析;融合表达
中图分类号:
作者姓名:
管宇;杨慧;于雪;郭广君;唐娜;魏凤;沈志强;肖跃强
作者机构:
山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600
文献出处:
引用格式:
[1]管宇;杨慧;于雪;郭广君;唐娜;魏凤;沈志强;肖跃强-.Marc-145细胞PKR基因遗传分析与表达)[J].动物医学进展,2022(12):61-66
A类:
Cercopithecus,aethiops
B类:
Marc,PKR,基因遗传,遗传分析,蛋白激酶,遗传特性,表达研究,氨基酸序列,行同,遗传进化分析,pEGFP,C1,N1,多克,克隆位点,增强型绿色荧光蛋白,重组质粒,转染,HEK293,荧光显微镜观察,blot,融合表达,编码区,bp,灵长类,哺乳动物,参考物,序列同源性,豚鼠,供体,体物,猪繁殖与呼吸综合征病毒,PRRSV,内复制,固有免疫,抗病毒,互作机制,序列分析
AB值:
0.302253
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