典型文献
SARS-CoV-2中和性纳米抗体的原核表达及中和活性检测
文献摘要：
纳米抗体(nanobody,Nb)作为目前已知的能与目标抗原结合的最小单位抗体,在生物医药、临床研究等方面具有良好的应用前景.根据大肠杆菌密码子偏好性优化合成严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome-coronavirus 2,SARS-CoV-2)中和性纳米抗体H11-D4基因,将其克隆到pET28a表达载体上后,转化至大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE3)进行诱导表达,通过镍柱纯化、质谱分析、Western Blot鉴定H11-D4的表达情况并使用中和试验验证其中和活性.研究结果显示,纳米抗体H11-D4可成功在大肠杆菌中表达,最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0mmol·L-1,37℃诱导5h.H11-D4抗体的分子量大小约为17.9kD,与预测值相符.经镍柱纯化后,产量为25.16 mg·L-1.透析复性后利用TritonX-114快速有效地去除了内毒素,中和试验成功验证了 H11-D4的中和活性(IC50)为171.1 nmol·L-1,研究结果可为纳米抗体的原核表达和新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)的预防及治疗提供基础数据支撑.
文献关键词：
纳米抗体;大肠杆菌;新冠病毒;中和试验
中图分类号：
作者姓名：
王海宁;刘兴健;高新桃;李轶女;沈兴家;张志芳;易咏竹
作者机构：
江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212100;中国农业科学院蚕业研究所,农业农村部蚕桑遗传改良重点实验室,江苏镇江212100;中国农业科学院生物技术研究所,北京100081
文献出处：
引用格式：
[1]王海宁;刘兴健;高新桃;李轶女;沈兴家;张志芳;易咏竹-.SARS-CoV-2中和性纳米抗体的原核表达及中和活性检测)[J].生物技术进展,2022(05):754-759
A类：
9kD
B类：
SARS,CoV,纳米抗体,原核表达,中和活性,活性检测,nanobody,Nb,抗原结合,生物医药,大肠杆菌,密码子偏好性,优化合成,严重急性呼吸综合征冠状病毒,severe,acute,respiratory,syndrome,coronavirus,H11,D4,pET28a,表达载体,感受态,Rosetta,DE3,诱导表达,质谱分析,Blot,中和试验,诱导条件,IPTG,0mmol,5h,分子量,TritonX,快速有效,内毒素,IC50,nmol,disease,预防及治疗,新冠病毒
AB值：
0.354778
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