典型文献
FpgMBV1-P4基因的原核表达及多克隆抗体制备
文献摘要：
假禾谷镰孢巨型双链RNA病毒1(Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1,FpgMBV1)是从假禾谷镰孢(Fusarium pseudograminearum)弱毒菌株FC136-2A中发现的一种真菌病毒.FpgMBV1共编码4个蛋白质,其中FpgMBV1-P4由268个氨基酸残基组成,功能未知.本研究设计特异性引物,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法从菌株FC136-2A的菌丝中扩增FpgMBV1-P4基因,构建原核表达载体pGEX4T-FpgMBV1-P4并转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)菌株,在25℃以0.5 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达重组蛋白.结果表明,FpgMBV1-P4基因长为807 bp,重组表达的融合蛋白分子量约为60 kD,与预期大小相符.将该重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔(Lepus sinensis),获得抗血清,采用间接ELISA测定其效价达1:160000,能够特异性检测到假禾谷镰孢菌丝中约36 kD的FpgMBV1-P4蛋白.研究结果为深入分析FpgMBV1-P4的结构和功能及进一步探讨FpgMBV1与假禾谷镰孢菌的相互作用提供了基础.
文献关键词：
真菌病毒;假禾谷镰孢巨型双链RNA病毒1(FpgMBV1);P4蛋白;原核表达;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
刘东伟;宋嘉庆;潘鑫;闫书味;李轲;范沛;高飞;张晓婷;代君丽;李洪连
作者机构：
河南农业大学植物保护学院,郑州450002;河南工业大学生物工程学院,郑州450001;小麦玉米作物学国家重点实验室,郑州450046
文献出处：
引用格式：
[1]刘东伟;宋嘉庆;潘鑫;闫书味;李轲;范沛;高飞;张晓婷;代君丽;李洪连-.FpgMBV1-P4基因的原核表达及多克隆抗体制备)[J].农业生物技术学报,2022(11):2246-2254
A类：
FpgMBV1,megabirnavirus,FC136,假禾谷镰孢菌
B类：
P4,多克隆抗体制备,巨型,双链,Fusarium,pseudograminearum,毒菌,2A,真菌病毒,氨基酸残基,基组,特异性引物,reverse,transcription,菌丝,原核表达载体,pGEX4T,大肠杆菌,Escherichia,coli,BL21,DE3,异丙基,半乳糖,糖苷,isopropyl,thiogalactoside,IPTG,诱导表达,重组蛋白,bp,重组表达,融合蛋白,分子量,kD,新西兰大白兔,Lepus,sinensis,抗血清,效价,特异性检测,结构和功能
AB值：
0.264738
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
