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前列腺特异性膜抗原(PSMA)纳米抗体基因的原核表达及天然噬菌体纳米抗体库筛选
文献摘要：
目的 筛选出抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)的纳米抗体.方法 利用天然噬菌体纳米抗体库,以PSMA为靶抗原进行三轮的淘选,采用ELISA鉴定阳性克隆,并进行测序分析,将筛选到的阳性克隆基因序列插入pET28a原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖昔(IPTG)诱导重组蛋白的表达,利用Ni柱进行亲和纯化,通过SDS-PAGE验证纯化产物.结果 筛选获得4条PSMA纳米抗体序列重链可变区1(VHH1)、VHH2、VHH3、VHH4,VHH1序列未能获得明确的原核表达蛋白,VHH2、VHH3、VHH4蛋白均表达.纯化后获得了纯度高、相对分子质量(Mr)约为17 000的抗PSMA纳米抗体.结论 通过天然噬菌体纳米抗体库淘筛,成功获得抗PSMA的纳米抗体序列并进行了原核表达和纯化.
文献关键词：
前列腺特异性膜抗原(PSMA);纳米抗体;噬菌体纳米抗体库;原核表达
中图分类号：
作者姓名：
张笑利;陈琨;江克华;何洁;安宇;何忠明;孙发
作者机构：
贵州大学医学院生物医学系,贵州贵阳550025;贵州省人民医院医学遗传科,贵州贵阳550003;贵州省人民医院泌尿外科,贵州贵阳550003
文献出处：
引用格式：
[1]张笑利;陈琨;江克华;何洁;安宇;何忠明;孙发-.前列腺特异性膜抗原(PSMA)纳米抗体基因的原核表达及天然噬菌体纳米抗体库筛选)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(11):1030-1035
A类：
噬菌体纳米抗体库,VHH1,VHH2,VHH3,VHH4
B类：
前列腺特异性膜抗原,PSMA,靶抗原,三轮,淘选,测序分析,基因序列,pET28a,原核表达载体,大肠杆菌,BL21,异丙基,半乳糖,IPTG,重组蛋白,亲和纯化,SDS,PAGE,纯化产物,可变区,相对分子质量,Mr,过天
AB值：
0.184814
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