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奶山羊乳铁蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
文献摘要：
为了制备奶山羊乳铁蛋白的多克隆抗体,为进一步的试验提供材料,该研究运用软件分析并选取最适合原核表达的LF序列进行扩增,将扩增出的序列与pET-32a(+)质粒连接,形成原核表达质粒pET-32a-LF,将质粒转化入大肠杆菌,在最适条件(37℃、0.5 mmol/L IPTG、4 h)下诱导表达出大量蛋白.通过Ni-NTA Resin法将蛋白纯化后皮下注射4月龄新西兰大耳兔,免疫注射结束后采集抗体血清,并用间接酶联免疫吸附法和免疫印迹法检测多抗的效价及特异性.结果显示克隆得到适合原核表达的279 bp的LF CDS片段,pET-32a(+)-LF原核表达载体成功构建并顺利表达(未形成包涵体),表达的截短蛋白大小为10 kD.抗体效价达到1:107;免疫印迹试验结果显示,原核表达的LF蛋白和山羊乳腺上皮细胞中的LF蛋白能够被该抗体特异性识别.
文献关键词：
奶山羊;乳铁蛋白(LF);抗体制备
中图分类号：
作者姓名：
钟玉玲;代邦国;杜伟伟;张华文;李纯;史怀平
作者机构：
西北农林科技大学 动物科技学院,陕西 杨凌 712100
文献出处：
引用格式：
[1]钟玉玲;代邦国;杜伟伟;张华文;李纯;史怀平-.奶山羊乳铁蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备)[J].家畜生态学报,2022(02):13-19
A类：
B类：
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AB值：
0.310925
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