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检测产单核细胞李氏杆菌溶血素的胶体金试纸条制备及初步应用
文献摘要：
产单核细胞李氏杆菌为重要的食源性病原菌,本研究旨在建立快速、灵敏、特异的检测方法,提高检测效率和检测通量.李氏杆菌溶血素(LLO)蛋白经原核表达后,制备单克隆抗体,测定单克隆抗体的亚型、效价及亲和力.柠檬酸钠法研制LLO胶体金试纸条,并对试纸条的特异性、敏感性、重复性、稳定性及模拟样品进行检测,并初步应用于实际海产品的检测.结果发现,制备的LLO单克隆抗体特异性强、稳定性高、重复性佳、灵敏度较高,亲和力好,亲和力常数为4.25×108 L·mol-1.人工污染样品试验表明灵敏度与纯细菌培养物基本一致,为3.0×105CFU·mL-1.将LLO胶体金试纸条应用于500份海产品的实际检测中,产单核细胞李氏杆菌的阳性检出率为2.20％(11/500),略低于国标检测方法(GB4789.30-2010)的 2.40％(12/500)和 PCR 检测方法的 2.40％(12/500),三者之间符合率为91.67％.另外缩短检测时间至15 min,检测效率大幅度提高.本研究建立的LLO胶体金检测方法可用于产单核细胞李氏杆菌的快速检测.
文献关键词：
产单核细胞李氏杆菌;李氏杆菌溶血素;单克隆抗体;胶体金试纸;海产品初步应用
中图分类号：
作者姓名：
江玲丽;高有领;胡兴娟;章先;杨云凯;魏华;方维焕
作者机构：
宁波卫生职业技术学院,宁波315100;浙江万里学院,宁波315100;舟山海关综合技术服务中心,舟山316021;浙江大学动物预防医学研究所,杭州310058
文献出处：
引用格式：
[1]江玲丽;高有领;胡兴娟;章先;杨云凯;魏华;方维焕-.检测产单核细胞李氏杆菌溶血素的胶体金试纸条制备及初步应用)[J].畜牧兽医学报,2022(06):1841-1848
A类：
产单核细胞李氏杆菌,李氏杆菌溶血素,海产品初步应用
B类：
测产,胶体金试纸条,食源性病原菌,高检,检测效率,LLO,原核表达,单克隆抗体,定单,效价,亲和力,柠檬酸钠,抗体特异性,力常数,细菌培养,105CFU,阳性检出率,略低于,国标,GB4789,符合率,检测时间,大幅度提高,快速检测
AB值：
0.140051
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