典型文献
齐帕特罗人工抗原合成及其多克隆抗体制备
文献摘要:
为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定后,通过免疫新西兰大白兔获得抗ZIL多抗血清,并对抗体效价、半数抑制浓度(IC50)和特异性进行鉴定.HPLC-MS检测结果显示,改造后的主产物分子质量为348.21 u,约占整个反应体系产物的92.23%,与ZIL-丁酸盐分子质量完全相符;SDS-PAGE电泳结果显示,BSA/OVA在电泳中的迁移速率明显大于偶联产物;UV结果显示,相比载体蛋白,偶联产物ZIL-BSA/OVA的特征吸收峰均发生了明显变化;ELISA效价检测结果表明,ZIL多抗血清效价在1:6400以上,通过建立标准曲线测得IC50分别为0.38 ng/mL和1.13 ng/mL,并且与沙丁胺醇(SAL)、特布他林(TBL)、溴布特罗(BRO)、西马特罗(CIM)、克仑特罗(CLB)、盐酸多巴胺(DH)、莱克多巴胺(RAC)、达氟沙星(DAN)、泰乐菌素(TYL)均不存在任何交叉反应.成功制备了ZIL完全抗原ZIL-BSA/OVA,获得了一种高灵敏度和高特异性的抗ZIL pAb,为后续建立ZIL免疫学快速检测方法奠定了基础.
文献关键词:
齐帕特罗;新型瘦肉精;半抗原;完全抗原;多克隆抗体
中图分类号:
作者姓名:
郭东光;陈明艳;冯春花;王丰;卞爽丽;李文明;王凯露;吕薇薇;郑文珺;陈子怡;孙国鹏;李雪华;田金河;李鹏;朱艳平;岳锋;王选年
作者机构:
新乡学院 生命科学与基础医学学院/动物疫病分子诊断河南省工程实验室,河南新乡 453000;新乡市农业综合行政执法支队,河南新乡 453000;郑州大学 生命科学技术学院,河南郑州 450000
文献出处:
引用格式:
[1]郭东光;陈明艳;冯春花;王丰;卞爽丽;李文明;王凯露;吕薇薇;郑文珺;陈子怡;孙国鹏;李雪华;田金河;李鹏;朱艳平;岳锋;王选年-.齐帕特罗人工抗原合成及其多克隆抗体制备)[J].动物医学进展,2022(05):6-12
A类:
齐帕特罗,帕特罗,ZIL,pAb,BRO,新型瘦肉精
B类:
人工抗原,多克隆抗体制备,备齐,完全抗原,丁酸乙酯,EDC,NHS,丁酸盐,中间体,牛血清白蛋白,BSA,卵清蛋白,OVA,偶联,紫外全波长扫描,UV,聚丙烯酰胺凝胶电泳,SDS,PAGE,新西兰大白兔,多抗,抗血清,抗体效价,半数抑制浓度,IC50,HPLC,主产,分子质量,反应体系,盐分,量完,联产,载体蛋白,特征吸收峰,效价检测,标准曲线,沙丁胺醇,SAL,特布他林,TBL,西马特罗,CIM,克仑特罗,CLB,DH,莱克多巴胺,RAC,达氟沙星,DAN,泰乐菌素,TYL,交叉反应,高灵敏度,续建,免疫学,快速检测方法,半抗原
AB值:
0.312507
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