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H3亚型犬流感病毒的荧光定量PCR方法建立及其增殖特性研究
文献摘要：
旨在建立H3亚型犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)荧光定量PCR方法,利用该方法对病毒在犬肾细胞(MDCK细胞)上增殖特性进行研究.根据CIV的血凝素(HA)片段上的HA2基因保守区设计并合成特异性引物,构建CIV-HA重组质粒作为标准品,经过条件优化,建立H3亚型CIV荧光定量检测方法,对其敏感性、特异性和重复性进行评价,并将该方法应用于CIV在MDCK细胞上增殖特性的研究,与病毒滴度(TCID50)进行相关性分析.结果 显示:该方法具有较好的敏感性、特异性和重复性,最低检测线可以达到20.8 copies/μL,与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒2型、H1亚型流感病毒不发生交叉反应,批间、批内重复性良好(变异系数＜1.1％).将该方法应用于检测CIV在MDCK细胞上的增殖特性,与细胞培养法测定病毒滴度相比,二者具有较好的相关性.本研究初步建立了H3亚型CIV荧光定量检测方法,该方法可为CIV的增殖特性研究提供工具.
文献关键词：
犬流感病毒;H3亚型;荧光定量PCR;染料法;增殖特性
中图分类号：
作者姓名：
程慧敏;黄程;林健;王小蕾;杨志远;段会娟;赵际成;潘洁;刘月焕;刘立新
作者机构：
北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100097
文献出处：
引用格式：
[1]程慧敏;黄程;林健;王小蕾;杨志远;段会娟;赵际成;潘洁;刘月焕;刘立新-.H3亚型犬流感病毒的荧光定量PCR方法建立及其增殖特性研究)[J].畜牧与兽医,2022(02):112-118
A类：
B类：
H3,犬流感病毒,增殖特性,canine,influenza,virus,CIV,肾细胞,MDCK,血凝素,HA2,并合,特异性引物,重组质粒,标准品,条件优化,荧光定量检测,病毒滴度,TCID50,检测线,copies,犬瘟热病毒,犬细小病毒,副流感病毒,腺病毒,H1,交叉反应,细胞培养法,染料法
AB值：
0.282624
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