典型文献
犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒多重PCR方法的建立及应用
文献摘要：
为建立一种特异、高通量同时检测犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、Ⅰ型及Ⅱ型犬冠状病毒(CCoV)的多重PCR方法,根据GenBank相关病毒基因序列,选取CPV VP2基因、CDV H基因和CCoV M基因高度保守序列区域,设计引物分别用于扩增长度为573 bp(CPV)、410 bp(CDV)、289 bp(CCoV-Ⅰ)、105 bp(CCoV-Ⅱ)的4条特异性目的片段.经反应条件优化,利用建立的多重PCR进行特异性、敏感性及重复性试验.结果表明,在同一PCR反应体系中可以同时检测到以上4种病毒,而大肠埃希氏菌、沙门氏菌、多形拟杆菌、犬副流感病毒(CPIV)及犬腺病毒(CAV)均未检测到,CPV、CDV、CCoV-Ⅰ及CCoV-Ⅱ的最低检测限分别为1×107 copies/μL、1×103 copies/μL、1×106 copies/μL和1×104 copies/μL,与单项PCR敏感性差异较小;3个不同浓度模板于不同时间、不同PCR仪器扩增,结果重复稳定性良好;使用该方法对50份临床病例进行检测,CPV、CDV、CCoV-Ⅰ及CCoV-Ⅱ的感染阳性率分别为32％(16/50)、24％(12/50)、18％(9/50)、10％(5/50),发现有CPV+CCoV-Ⅰ、CCoV-Ⅰ+CCoV-Ⅱ及CDV+CCoV-Ⅰ+CCoV-Ⅱ混合感染病例.证明建立的多重PCR具有高效、敏感、特异性强、重复性好的特点,并能够实际应用于临床样品检测中,为今后犬重要疫病的流行病学调查及病原学研究提供帮助.
文献关键词：
多重PCR;犬细小病毒;犬瘟热病毒;犬冠状病毒Ⅰ型;犬冠状病毒Ⅱ型
中图分类号：
作者姓名：
李少晗;陈鑫;张广智;刘维全;秦彤
作者机构：
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;农业农村部兽用药物与诊断技术北京科学观测实验站,北京 100193;中国农业大学生物学院,北京 100193
文献出处：
引用格式：
[1]李少晗;陈鑫;张广智;刘维全;秦彤-.犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒多重PCR方法的建立及应用)[J].动物医学进展,2022(12):31-36
A类：
CCoV,扩增长度,CPIV,CPV+CCoV,+CCoV,CDV+CCoV
B类：
犬瘟热病毒,犬细小病毒,犬冠状病毒,建立及应用,同时检测,GenBank,病毒基因,基因序列,VP2,保守序列,引物,bp,反应条件优化,重复性试验,反应体系,大肠埃希氏菌,沙门氏菌,多形拟杆菌,副流感病毒,腺病毒,CAV,未检,检测限,copies,敏感性差异,混合感染,感染病,样品检测,疫病,流行病学调查,病原学研究
AB值：
0.196628
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