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犬圆环病毒荧光RAA检测方法的建立及初步应用
文献摘要：
为建立一种高效、简便的犬圆环病毒(CCV)的检测方法,本研究针对CCV Rep基因设计了特异性引物和探针,同时构建了基于该病毒Rep基因的重组质粒标准品pCCV-Rep,经过优化后确定了CCV重组酶介导核酸等温扩增(RAA)检测方法引物、探针的最适浓度均为10μmol/L,在39℃恒温条件下20 min即可完成检测.利用该方法检测犬圆环病毒、狂犬病病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒等其他常见的犬源病毒,结果显示除CCV外,该方法对其他病毒均无交叉反应,特异性较强;将pCCV-Rep分别稀释为106拷贝/μL～100拷贝/μL后作为模板,进行敏感性试验,结果显示该方法最低检出限可达102拷贝/μL,敏感性较高;批内批间重复性试验结果均表明该方法具有良好的重复性.采用该方法与常规PCR方法同时检测82份犬粪便拭子,结果显示,该RAA方法检出阳性样品5份,检测结果与常规PCR一致.本实验首次建立的CCV荧光RAA检测方法简便、高效、特异、灵敏,为CCV的临床筛查与流行病学研究提供了可行技术.
文献关键词：
犬圆环病毒;重组酶介导核酸等温扩增技术;检测方法
中图分类号：
作者姓名：
吕荞;刘宇梦;于子萍;汪伟;胡传活;郑敏;孙文超
作者机构：
广西大学 动物科学技术学院,广西 南宁 530003;广西动物疫病预防控制中心,广西 南宁 530004;温州大学 病毒学研究所,浙江 温州 325035
文献出处：
引用格式：
[1]吕荞;刘宇梦;于子萍;汪伟;胡传活;郑敏;孙文超-.犬圆环病毒荧光RAA检测方法的建立及初步应用)[J].中国预防兽医学报,2022(09):958-962
A类：
犬圆环病毒,pCCV,重组酶介导核酸等温扩增技术
B类：
RAA,初步应用,Rep,特异性引物,重组质粒,标准品,最适浓度,恒温,狂犬病病毒,犬细小病毒,犬瘟热病毒,副流感病毒,腺病毒,交叉反应,拷贝,敏感性试验,低检出限,重复性试验,同时检测,犬粪,粪便,首次建立,临床筛查,流行病学研究
AB值：
0.209528
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