典型文献
柑橘大实蝇化学感受蛋白基因BminCSP3的克隆、表达及结合特征分析
文献摘要：
[目的]探究在柑橘大实蝇成虫触角高表达的化学感受蛋白BminCSP3与气味配体的结合特性,以期为揭示柑橘大实蝇嗅觉识别的分子机制提供一定理论依据.[方法]通过RT-PCR克隆BminCSP3基因,并对其进行生物信息学分析;以原核表达系统和镍柱体外表达纯化得到BminCSP3蛋白;利用荧光竞争结合实验检测BminCSP3与14种气味配体的结合特性.[结果]BminCSP3开放阅读框全长为474 bp,编码157个氨基酸,含有4个半胱氨酸残基,为典型的化学感受蛋白;预测其等电点为5.41,信号肽由22个氨基酸组成,无跨膜结构域,亲水性总平均值为-0.397,是亲水性蛋白.荧光竞争结合实验结果表明,BminCSP3与供试14种气味配体的亲和力均较弱,其Ki值均大于20 pmol·L-1.一般认为Ki值大于20 μmol·L-1,说明蛋白与配体分子间的亲和力较弱.[结论]BminCSP3虽然在柑橘大实蝇成虫触角中显著上调表达,但可能不参与柑橘大实蝇成虫的嗅觉识别过程;或本试验所用配体并非BminCSP3最适配体,应扩大配体库进一步验证BminCSP3的嗅觉功能.
文献关键词：
柑橘大实蝇;化学感受蛋白;原核表达;蛋白纯化;荧光竞争结合实验
中图分类号：
作者姓名：
王兆祥;陈剑;杨岭;田晓丽;桂连友;王福莲;张国辉
作者机构：
长江大学农学院·长江大学昆虫研究所,湖北荆州434025;长江大学生命科学学院,湖北荆州434025
文献出处：
引用格式：
[1]王兆祥;陈剑;杨岭;田晓丽;桂连友;王福莲;张国辉-.柑橘大实蝇化学感受蛋白基因BminCSP3的克隆、表达及结合特征分析)[J].果树学报,2022(03):343-351
A类：
BminCSP3,荧光竞争结合实验
B类：
柑橘大实蝇,化学感受蛋白,成虫,触角,气味,结合特性,嗅觉识别,生物信息学分析,原核表达,表达系统,柱体,体外表达,表达纯化,实验检测,开放阅读框,全长,bp,残基,等电点,信号肽,氨基酸组成,跨膜结构域,亲水性,亲和力,Ki,pmol,识别过程,适配体,嗅觉功能,蛋白纯化
AB值：
0.208266
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