目的 探讨miR-29a-3p通过靶向高迁移率族蛋白1(HMGB1)/toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号轴减轻哮喘患儿气道炎症的机制.方法 收集52例哮喘患儿与50例健康对照儿童外周血,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测血浆miR-29 a-3 p表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中炎症因子水平.使用卵清蛋白构建哮喘大鼠模型,腹腔注射miR-29a-3p激动剂过表达miR-29a-3p,收集一侧支气管肺泡灌洗液(BALF),计数总白细胞与嗜酸性粒细胞并检测炎症因子水平,取另一侧肺组织行HE染色观察病理表现.采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-29a-3p与HMGB1的靶向关系,并检测HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白表达情况.血小板激活因子(PAF)干预人支气管上皮细胞系16 HBE模拟哮喘体外模型,通过转染过表达miR-29a-3p与HMGB1,检测细胞HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白与炎症因子表达情况.结果 与健康儿童比较,哮喘患儿血浆中miR-29a-3p表达水平显著降低(P<0.05),而炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平均升高(P<0.05),miR-29a-3p表达水平与TNF-α、IL-1β、IL-6水平均呈负相关(P<0.05).过表达miR-29 a-3 p能改善哮喘模型大鼠支气管管腔变窄、管壁增厚、支气管及周围血管炎症细胞浸润的现象,显著降低肺组织炎症评分,减少BALF中的总白细胞数与嗜酸性粒细胞(EOS)计数,降低炎症因子水平(P<0.05).经双荧光素酶报告基因系统证实miR-29a-3p能靶向抑制HMGB1,且HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白表达水平在哮喘模型中显著增加(P<0.05).过表达miR-29a-3p可以减少PAF刺激细胞后HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白及其调控的炎症因子表达,但过表达HMGB1会抵消这种作用(P<0.05).结论 miR-29a-3p在哮喘患儿中的表达水平显著降低,与气道炎症水平的升高密切相关,过表达miR-29a-3p可以通过靶向抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白表达减轻炎症.

miR-29a-3p;高迁移率族蛋白1;toll样受体4;核因子-κB;哮喘;气道炎症;儿童

蹇强;李丹;程玮;唐甜甜

陕西省西安市儿童医院 急诊科,陕西西安 710003;陕西省西安市儿童医院 感染科,陕西西安 710003;陕西省西安市儿童医院 呼吸科,陕西西安 710003

国际检验医学杂志

[1]蹇强;李丹;程玮;唐甜甜-.miR-29a-3p通过靶向HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴减轻哮喘患儿气道炎症的机制研究)[J].国际检验医学杂志,2022(18):2201-2206

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