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哺乳动物正呼肠孤病毒血清3型Dearing σ1蛋白纯化及其多克隆抗体制备
文献摘要：
目的 纯化哺乳动物正呼肠孤病毒(MRV)血清3型Dearing(T3D)σ1融合蛋白,制备T3Dσ1多克隆抗体.方法 将T3DS1-pET28a重组质粒转化至Rosetta(DE3)感受态细胞,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖昔(IPTG)诱导目的蛋白大量表达,经组氨酸标签Ni-IDA层析柱纯化得到T3Dσ1融合蛋白.纯化得到的蛋白免疫新西兰白兔制备σ1蛋白特异性多克隆抗体.通过间接ELISA检测多克隆抗体效价,Western blot法及间接免疫荧光法(IFA)检测多克隆抗体特异性.结果 T3Dσ1蛋白相对分子质量(Mr)约为32 000,主要为包涵体形式,通过变性、复性处理纯化融合蛋白;免疫新西兰白兔成功制备出T3Dσ1效价大于1∶106的多克隆抗体,并成功应用于Western blot法及IFA检测.结论 成功制备了高效价及高灵敏度T3Dσ1多克隆抗体.
文献关键词：
T3DS1-pET28a质粒;σ1蛋白;哺乳动物正呼肠孤病毒(MRV);蛋白纯化;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
李婷婷;于美玲;陶晓莉;李藤菲;林家锋;李永刚
作者机构：
锦州医科大学病原生物学教研室,辽宁锦州121000
文献出处：
引用格式：
[1]李婷婷;于美玲;陶晓莉;李藤菲;林家锋;李永刚-.哺乳动物正呼肠孤病毒血清3型Dearing σ1蛋白纯化及其多克隆抗体制备)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(02):171-176
A类：
哺乳动物正呼肠孤病毒,Dearing,T3D,T3DS1
B类：
毒血,蛋白纯化,多克隆抗体制备,MRV,融合蛋白,pET28a,重组质粒,Rosetta,DE3,感受态,异丙基,吡喃,半乳糖,IPTG,目的蛋白,组氨酸,IDA,层析柱,新西兰白兔,抗体效价,blot,间接免疫荧光法,IFA,抗体特异性,白相,相对分子质量,Mr,包涵体,成功应用,高灵敏度
AB值：
0.210733
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