典型文献
人乳头瘤病毒58型(HPV58)主要衣壳蛋白L1的可溶性表达及应用
文献摘要：
目的 原核表达获得人乳头瘤病毒58型主要衣壳蛋白L1(HPV58 L1)并进行鉴定.方法 将HPV58 L1蛋白的重组表达菌pE-SUMO-58 L1(BI21)经IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot法鉴定重组SUMO-58 L1蛋白的表达情况;经Ni柱纯化获得重组SUMO-58 L1蛋白,经泛素样蛋白酶1(ULP1)酶切去除SUMO标签获得重组HPV58 L1蛋白,红细胞凝集试验(HA)验证HPV58 L1蛋白活性;再将重组HPV58 L1蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA测定免疫血清效价,间接免疫荧光试验(IFA)检测免疫血清与HEK293T细胞瞬时表达的HPV58 L1蛋白的反应情况.结果 重组蛋白SUMO-58 L1在大肠杆菌中可溶性表达量较高,其相对分子质量(Mr)约72 000.经Ni-NTA亲和纯化后,再用ULP1去除SUMO标签最终得到Mr 约58 000的HPV58 L1蛋白,该重组蛋白具有类似于HPV病毒的凝集小鼠红细胞的血凝活性,其血凝价为1∶16.ELISA测定HPV58 L1蛋白免疫小鼠血清效价最高可达1∶10 240,且免疫血清可与HEK293T细胞瞬时表达的HPV58 L1蛋白发生特异反应.结论 经大肠杆菌表达系统成功获得了具有血凝活性的重组HPV58 L1蛋白,其免疫血清可用于免疫细胞化学检测真核细胞表达的HPV58 L1蛋白.
文献关键词：
人乳头瘤病58型(HPV58);L1蛋白;原核表达;间接免疫荧光技术(IFA)
中图分类号：
作者姓名：
陈玉梅;栗宁;薛明岩;周景明;祁艳华;殷佳佳;张雨晴;李昱雅;王爱萍
作者机构：
郑州大学生命科学学院,河南郑州450001
文献出处：
引用格式：
[1]陈玉梅;栗宁;薛明岩;周景明;祁艳华;殷佳佳;张雨晴;李昱雅;王爱萍-.人乳头瘤病毒58型(HPV58)主要衣壳蛋白L1的可溶性表达及应用)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(06):553-558
A类：
pE,BI21,ULP1
B类：
人乳头瘤病毒,HPV58,衣壳蛋白,L1,可溶性表达,原核表达,重组表达,SUMO,IPTG,诱导表达,SDS,PAGE,blot,泛素,切去,红细胞凝集,HA,蛋白活性,BALB,免疫血清,效价,间接免疫荧光试验,IFA,HEK293T,瞬时表达,重组蛋白,相对分子质量,Mr,NTA,亲和纯化,血凝活性,血凝价,小鼠血清,白发,大肠杆菌表达,表达系统,免疫细胞化学,化学检测,真核细胞,免疫荧光技术
AB值：
0.264893
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