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兔抗人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)多克隆抗体的制备及应用
文献摘要：
目的 制备特异性识别人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)的兔多克隆抗体.方法 通过比对GFPT1及其高度同源的同工酶GFPT2的蛋白质序列,针对GFPT1的特异性序列设计并合成2个多肽,多肽与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联作为抗原免疫新西兰大白兔,3次加强免疫后得到抗血清,采用ELISA检测抗血清效价.构建GFPT1和GFPT2的大肠杆菌表达载体,诱导表达获得GFPT1和GFPT2重组蛋白,通过Western blot法检测GFPT1和GFPT2重组蛋白以验证抗血清的特异性、免疫荧光细胞化学染色检测786-O细胞GFPT1的表达验证获得的抗血清能否识别内源性表达的GFPT1.结果 获得了特异性识别GFPT1的多克隆抗体,效价高达1:1 458 000,该抗体可用于Western blot法以及免疫荧光细胞化学染色.结论 成功制备了特异性识别GFPT1的兔多克隆抗体.
文献关键词：
谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1);重组蛋白;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
吴少春;刘林;高艳春;顾玉超
作者机构：
中国海洋大学医药学院糖生物学实验室,山东青岛266000
文献出处：
引用格式：
[1]吴少春;刘林;高艳春;顾玉超-.兔抗人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)多克隆抗体的制备及应用)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(07):651-656
A类：
GFPT1,GFPT2
B类：
谷氨酰胺,果糖,氨基转移酶,多克隆抗体,特异性识别,别人,同工酶,蛋白质序列,特异性序列,序列设计,并合,多肽,血蓝蛋白,KLH,偶联,联作,新西兰大白兔,加强免疫,抗血清,效价,大肠杆菌表达,表达载体,诱导表达,重组蛋白,blot,免疫荧光,内源性,价高
AB值：
0.201224
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