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灰飞虱脂肪酶LsLPS的原核表达及Ni-NTA纯化
文献摘要：
灰飞虱是危害中国水稻的3种主要稻飞虱之一.脂肪酶是脂肪代谢的关键酶,在昆虫发育、繁殖等生理活动中具有重要作用.为了深入研究脂肪酶(LsLPS)在灰飞虱生长发育中的功能,本研究克隆了LsLPS基因ORF序列,并进行了原核表达和His标签融合蛋白的纯化.结果显示,灰飞虱LsLPS开放阅读框长1293 bp,可翻译成430个氨基酸,含有信号肽序列和PF00151结构域.LsLPS连接到原核表达载体pET28a(+)-SUMO、pCold I后在表达菌株BL21(DE3)中主要以包涵体形式表达,连接到pET43.1a(+)后可在表达菌株BL21(DE3)中可溶性表达.采用pH 8.0、含20 mmol/L咪唑的磷酸缓冲液作为平衡液,Ni-NTA纯化LsLPS-pET43.1a(+)融合蛋白的纯度和产量相对较高.
文献关键词：
灰飞虱;脂肪酶;LsLPS基因;原核表达;Ni-NTA纯化
中图分类号：
[1]
农业科学（S）
/
植物保护（S4）
/
病虫害及其防治（S43）
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农作物病虫害及其防治（S435）
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禾谷类作物病虫害（S435.1）
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稻病虫害（S435.11）
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虫害（S435.112）
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稻虱（S435.112+.3）
作者姓名：
王利华;张玉;郑州廷;曹越;纪锐;方继朝
作者机构：
南京农业大学植物保护学院,江苏 南京 210095;江苏省农业科学院植物保护研究所,江苏 南京 210014
文献出处：
引用格式：
[1]王利华;张玉;郑州廷;曹越;纪锐;方继朝-.灰飞虱脂肪酶LsLPS的原核表达及Ni-NTA纯化)[J].江苏农业学报,2022(03):611-616
A类：
LsLPS,PF00151,pET43
B类：
灰飞虱,脂肪酶,NTA,水稻,稻飞虱,脂肪代谢,关键酶,昆虫,ORF,His,标签融合,融合蛋白,蛋白的纯化,开放阅读框,bp,翻译成,信号肽,肽序列,结构域,接到,原核表达载体,pET28a,SUMO,pCold,BL21,DE3,包涵体,1a,可溶性表达,咪唑,缓冲液
AB值：
0.327637
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