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结核分枝杆菌Rv2107基因编码蛋白PE22的原核表达及生物信息学分析
文献摘要：
目的 原核表达结核分枝杆菌(MTB)Rv2107基因编码蛋白PE22,并对PE22蛋白进行生物信息学分析.方法 以卡介苗(BCG)基因组为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增Rv2107基因,克隆至表达载体pET-32a获得重组质粒PE22-pET-32a,对含重组质粒PE22-pET-32a的BL-21菌诱导表达后,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,亲和层析法纯化PE22蛋白并蛋白质印迹法(Western bolt)鉴定.采用Expasy ProtParam、TMHMM Server v.2.0、SignalP 5.0 Server、NetPhos-3.1、Cell-PLoc 2.0、SOPMA、SWISS MODEL、ABCpred、SYFPEITHI等软件分析PE22蛋白的相关生物信息学.结果 成功构建重组质粒PE22-pET-32a,并获得以包涵体形式表达的PE22蛋白.生物信息学分析显示PE22蛋白相对分子质量为10373.77,理论等电点为6.82,由98个氨基酸组成,为疏水性蛋白,无跨膜区与信号肽,定位于细胞壁,二级结构主要由α-螺旋构成.抗原表位预测分析显示PE22蛋白含有10个B细胞抗原表位、13个T细胞抗原表位与12个限制性CTL细胞表位.结论 PE22蛋白的原核表达主要以包涵体形式表达,具有多个潜在的T、B细胞抗原表位,可作为研发新型免疫诊断试剂的候选分子靶标或TB疫苗的候选蛋白.
文献关键词：
结核分枝杆菌;Rv2107基因;PE22蛋白;原核表达;生物信息学
中图分类号：
作者姓名：
李玉洁;杨雨婷;杨国平
作者机构：
大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室,云南大理 671000;大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室,云南大理 671000
文献出处：
引用格式：
[1]李玉洁;杨雨婷;杨国平-.结核分枝杆菌Rv2107基因编码蛋白PE22的原核表达及生物信息学分析)[J].现代医药卫生,2022(22):3816-3822
A类：
Rv2107,PE22
B类：
结核分枝杆菌,基因编码,编码蛋白,原核表达,生物信息学分析,MTB,卡介苗,BCG,聚合酶链反应,表达载体,pET,32a,重组质粒,BL,诱导表达,十二烷基硫酸钠,聚丙烯酰胺凝胶电泳,SDS,PAGE,达产,亲和层析,层析法,蛋白质印迹法,bolt,Expasy,ProtParam,TMHMM,Server,SignalP,NetPhos,Cell,PLoc,SOPMA,SWISS,MODEL,ABCpred,SYFPEITHI,包涵体,白相,相对分子质量,等电点,氨基酸组成,疏水性,信号肽,细胞壁,二级结构,抗原表位,表位预测,预测分析,限制性,CTL,细胞表位,免疫诊断,诊断试剂,分子靶标
AB值：
0.3185
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