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麻疹病毒载体中外源基因插入位置对基因表达及病毒复制的影响
文献摘要：
目的:研究麻疹病毒(measles virus，MV)沪191株载体中，外源基因插入位置对基因表达及病毒复制的影响。方法:将新型冠状病毒S1蛋白表达序列克隆至MV反基因组不同基因间隔区(N基因前、P和M基因之间、H和L基因之间)，与分别表达T7聚合酶及N、P、L蛋白的辅助质粒共转染293T细胞，转染后细胞裂解上清感染Vero细胞，以获得重组病毒。通过RT-PCR、免疫荧光法、Western blot和ELISA检测S1蛋白，并对重组病毒的增殖特性进行检测。结果:S1克隆至MV N基因前转染未得到重组病毒，克隆至P和M基因之间、H和L基因之间成功获得了重组病毒MV-M-S1、MV-L-S1，并可检测到S1蛋白的表达。MV-M-S1的S1表达量高于MV-L-S1，但病毒滴度低于MV-L-S1。结论:将外源基因插入MV基因组中不同位置，对基因表达及病毒复制将产生不同影响，为后续MV载体的改造提供了经验和参考。
文献关键词：
麻疹病毒沪191株;麻疹病毒载体;反向遗传学;S1蛋白
中图分类号：
作者姓名：
苏文浩;任秀秀;赵婷婷;王轶男;李实实;黄秋芳;王晓杰;张晓焕;卫江波
作者机构：
国药中生生物技术研究院卫江波实验室，北京 101111
文献出处：
引用格式：
[1]苏文浩;任秀秀;赵婷婷;王轶男;李实实;黄秋芳;王晓杰;张晓焕;卫江波-.麻疹病毒载体中外源基因插入位置对基因表达及病毒复制的影响)[J].中华微生物学和免疫学杂志,2022(12):924-930
A类：
麻疹病毒载体,反基因组
B类：
外源基因,基因插入,病毒复制,measles,virus,MV,S1,列克,基因间隔区,T7,质粒,共转染,293T,上清,Vero,重组病毒,免疫荧光法,blot,增殖特性,病毒滴度,不同位置,反向遗传学
AB值：
0.221599
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