典型文献
表达人CD137配体重组腺病毒的构建及其抗肿瘤免疫作用的研究
文献摘要:
目的:构建并制备表达人CD137L蛋白的5型重组腺病毒(Ad5-CD137L),并初步研究其在小鼠中的抗肿瘤免疫效果。方法:将密码子优化CD137L蛋白的表达基因插入pDC316穿梭质粒,并与pBH-GloxΔE1,3Cre腺病毒骨架质粒,共同转染HEK293细胞,构建Ad5-CD137L种子。扩增并纯化后,对所得Ad5-CD137L重组腺病毒的插入目的基因与蛋白表达情况进行鉴定。检测Ad5-CD137L在C57BL/6小鼠体内的特异性细胞免疫和抗肿瘤免疫水平。结果:成功地构建了Ad5-CD137L,PCR和测序结果表明插入目的基因与构建理论值相符。免疫荧光法鉴定Ad5-CD137L能在HEK293细胞中表达目的蛋白,经Western印迹法鉴定该目的蛋白的相对分子质量约为25 000,与理论值相符。与空腺病毒相比,Ad5-CD137L能显著诱导小鼠特异性IFN-γ(
t=6.315,
P=0.003),抗肿瘤免疫效果更显著(
t21 d=8.275,
t29 d=4.492;
t39 d=5.101,
P均<0.001)。
结论:成功构建了Ad5-CD137L,该重组病毒具有特异性细胞免疫原性和抗肿瘤免疫效果。
文献关键词:
4-1BB配体;重组腺病毒;抗肿瘤免疫;蛋白表达;免疫原性;细胞特异性
中图分类号:
作者姓名:
吴洁;张柯欣;安彤;李思奇;朱赟;陈刚;庄昉成;高孟
作者机构:
杭州医学院基础医学院与法医学院,杭州 310053
文献出处:
引用格式:
[1]吴洁;张柯欣;安彤;李思奇;朱赟;陈刚;庄昉成;高孟-.表达人CD137配体重组腺病毒的构建及其抗肿瘤免疫作用的研究)[J].国际流行病学传染病学杂志,2022(04):257-262
A类:
pBH,Glox,3Cre,t21,t29,t39
B类:
达人,重组腺病毒,抗肿瘤免疫,免疫作用,CD137L,Ad5,免疫效果,密码子优化,表达基因,基因插入,pDC316,穿梭,质粒,E1,转染,HEK293,目的基因,C57BL,细胞免疫,免疫水平,理论值,免疫荧光法,目的蛋白,相对分子质量,IFN,重组病毒,免疫原性,1BB,细胞特异性
AB值:
0.212589
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