典型文献
细胞嗜性差异的2株柯萨奇病毒A10型的构建与拯救
文献摘要：
目的 以Vero细胞及人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞嗜性差异的柯萨奇病毒A10型(Coxsackievirus A10,CV-A10)2个毒株为模板,分别构建感染性克隆,并完成病毒拯救,为CV-A10毒株的细胞嗜性研究奠定基础.方法 分别扩增Vero+/RD+及Vero-/RD+细胞嗜性差异的CV-A10毒株基因组,在5'端引入T7启动子序列,3'端引入polyA尾及Not I酶切位点.将扩增得到的基因组序列与线性化pBR322载体以无缝连接技术连接得到全长质粒,经线性化后分别与T7-RNA聚合酶表达质粒共转染RD细胞完成病毒拯救.通过病毒感染后细胞形态观察及间接免疫荧光试验,比较拯救毒株对Vero细胞嗜性的差异.结果 成功构建了 Vero细胞嗜性差异的CV-A10毒株2种感染性克隆,并在RD细胞内完成病毒拯救,序列测定结果表明拯救毒株与亲本毒株序列一致.拯救毒株rCV-A10-010195能够有效感染Vero细胞并形成典型的细胞病变(cytopathic effect,CPE),而rCV-A10-3482无法有效感染Vero细胞.结论 建立了2株Vero细胞嗜性差异的CV-A10毒株反向遗传操作系统,为CV-A10毒株细胞嗜性的研究奠定了基础.
文献关键词：
Vero细胞;柯萨奇病毒A10型;感染性cDNA;病毒拯救;细胞嗜性
中图分类号：
作者姓名：
裴捷;杨祥;汪梦俊;刘睿伦;周金戈;吕诗韵;王文辉;郭靖;孟胜利;申硕
作者机构：
武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室国家联合疫苗工程技术研究中心湖北省疫苗技术创新中心,湖北武汉430207
文献出处：
引用格式：
[1]裴捷;杨祥;汪梦俊;刘睿伦;周金戈;吕诗韵;王文辉;郭靖;孟胜利;申硕-.细胞嗜性差异的2株柯萨奇病毒A10型的构建与拯救)[J].中国生物制品学杂志,2022(12):1437-1442
A类：
细胞嗜性,Vero+,RD+,rCV
B类：
柯萨奇病毒,A10,横纹肌肉瘤,rhabdomyosarcoma,Coxsackievirus,毒株,感染性克隆,病毒拯救,T7,启动子序列,polyA,Not,酶切位点,基因组序列,线性化,pBR322,无缝连接,连接技术,接得,全长,质粒,经线,共转染,细胞形态,形态观察,间接免疫荧光试验,序列测定,测定结果,亲本,细胞病变,cytopathic,effect,CPE,反向遗传,遗传操作,操作系统,cDNA
AB值：
0.262956
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