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典型文献
犬肺表面活性蛋白A的克隆及其在昆虫杆状病毒系统的表达
文献摘要:
利用RT-PCR方法扩增犬肺表面活性蛋白A(canine lung surfactant protein A,cSP-A)基因,将其连接至pMD18-T载体,经测序正确后,使用DNAMAN软件比对不同种属SP-A基因序列;将cSP-A基因片段经双酶切后连接至pFastbacl载体得到pFastbacl-cSP-A;再将其转化至DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒,然 后转染sf9细胞得到P1代重组杆状病毒PlrBv-cSP-A4,Pl代病毒连续扩增3代后,取P4 rBv-cSP-A感染sf9细胞表达cSP-A重组蛋白,利用蛋白免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定表达产物.结果显示cSP-A基因大小为699bp;不同种属间SP-A的C末端碳水化合物识别结构域的同源性为49.1%~95.5%;经Western Blot和IFA鉴定,重组cSP-A蛋白在细胞内表达未分泌到胞外,分子量大小约为31.84 kDa.
文献关键词:
犬;肺表面活性蛋白A;克隆;昆虫杆状病毒表达系统;表达
作者姓名:
熊海凤;吴汉文;黄学婷;李明;周倩;崔雅倩;祁克宗;刘红梅
作者机构:
兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室,安徽省动物性食品质量与生物安全工程实验室,安徽农业大学动物科技学院,合肥230036
引用格式:
[1]熊海凤;吴汉文;黄学婷;李明;周倩;崔雅倩;祁克宗;刘红梅-.犬肺表面活性蛋白A的克隆及其在昆虫杆状病毒系统的表达)[J].安徽农业大学学报,2022(03):449-453
A类:
cSP,pFastbacl,PlrBv,rBv,699bp
B类:
肺表面活性蛋白,canine,lung,surfactant,protein,pMD18,DNAMAN,软件比对,不同种属,基因序列,双酶,DH10Bac,感受态,Bacmid,质粒,转染,sf9,P1,重组杆状病毒,A4,P4,重组蛋白,蛋白免疫印迹,间接免疫荧光试验,试验鉴定,达产,属间,碳水化合物,结构域,同源性,Blot,IFA,未分,分子量,kDa,昆虫杆状病毒表达系统
AB值:
0.306746
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