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鸡异质核糖核蛋白AB单克隆抗体的制备及鉴定
文献摘要：
为研制鸡异质核糖核蛋白AB(hnRNPAB)单克隆抗体,为其生物学功能研究提供关键试剂,构建重组质粒pET-30a-hnRNPAB,转化感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并通过树脂Ni对可溶性表达的鸡hnRNPAB蛋白进行亲和层析纯化之后免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术制备抗鸡hnRNPAB的单克隆抗体细胞株,最终通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选获得1株单克隆抗体杂交瘤细胞株5H2-H1.间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分析表明,5H5-H1单克隆抗体可特异性识别鸡胚成纤维细胞(CEF)表达的hnRNPAB蛋白.同时IFA和间接免疫细胞化学试验(ICA)结果还显示,除了特异性识别鸡hnRNPAB蛋白之外,5H5-H1单克隆抗体还可以与源自人、鼠、猴、牛和猪在内的5种常见哺乳动物细胞系表达的hnRNPAB发生特异性反应.
文献关键词：
鸡;异质核糖核蛋白;单克隆抗体;间接免疫荧光试验;Western blot分析;间接免疫细胞化学试验
中图分类号：
作者姓名：
罗俊;党露;郑鹿平;刘金玲;柴书军;赵东;杨艳艳;滕蔓
作者机构：
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州450002;广州医科大学附属第三医院,广东广州510095
文献出处：
引用格式：
[1]罗俊;党露;郑鹿平;刘金玲;柴书军;赵东;杨艳艳;滕蔓-.鸡异质核糖核蛋白AB单克隆抗体的制备及鉴定)[J].河南农业科学,2022(02):127-132
A类：
异质核糖核蛋白,hnRNPAB,5H5,间接免疫细胞化学试验
B类：
单克隆抗体的制备,生物学功能,功能研究,重组质粒,pET,30a,化感,感受态,coli,BL21,IPTG,诱导表达,可溶性表达,亲和层析,层析纯化,Balb,细胞融合,融合技术,体细胞,间接酶联免疫吸附试验,iELISA,杂交瘤细胞株,5H2,H1,间接免疫荧光试验,IFA,蛋白质免疫印迹,blot,特异性识别,鸡胚成纤维细胞,CEF,ICA,白之,哺乳动物细胞,细胞系
AB值：
0.244482
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