典型文献
重组金黄色葡萄球菌肠毒素B的原核表达、纯化及其免疫原性
文献摘要：
目的 对金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)基因定点突变体进行克隆、表达及纯化,并检测其免疫原性,为研制马抗SEB免疫球蛋白F(ab')2制品奠定基础.方法 对SEB基因序列进行定点突变和修饰以及偏性密码子优化后,构建重组表达质粒pET-22b-SEB,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达重组SEB蛋白,经离子交换层析纯化后,HPLC法检测重组SEB蛋白抗原纯度.Western blot法检测重组SEB蛋白抗原免疫活性;将不同浓度重组SEB蛋白抗原腹腔注射BALB/c小鼠,进行致病力、抗体效价、中和抗体活性检测.结果 质粒pET-22b-SEB经双酶切及测序鉴定证明构建正确.纯化的重组SEB蛋白相对分子质量约28 300,纯度大于90％,与天然SEB具有一致的免疫活性,且具有良好的安全性;免疫小鼠抗体效价达1∶81 920,可有效诱导小鼠产生中和抗体.结论 成功对SEB进行了定点突变减毒,经克隆、表达及纯化获得高纯度的重组SEB蛋白抗原,具有良好的免疫原性.
文献关键词：
金黄色葡萄球菌肠毒素B;重组抗原;表达;纯化;免疫原性
中图分类号：
作者姓名：
韩慧;史伯昌;李欣昱;李华斌;田崇瑜;闫芳;石艳春;郑源强;赵忠鹏
作者机构：
内蒙古医科大学内蒙古自治区分子生物学重点实验室,内蒙古呼和浩特010058;安徽医科大学基础医学院,安徽合肥230032;山西农业大学动物医学学院,山西晋中030800
文献出处：
引用格式：
[1]韩慧;史伯昌;李欣昱;李华斌;田崇瑜;闫芳;石艳春;郑源强;赵忠鹏-.重组金黄色葡萄球菌肠毒素B的原核表达、纯化及其免疫原性)[J].中国生物制品学杂志,2022(09):1065-1068,1075
A类：
B类：
金黄色葡萄球菌肠毒素,原核表达,免疫原性,staphylococcal,enterotoxin,SEB,基因定点突变,突变体,免疫球蛋白,ab,基因序列,密码子优化,重组表达,质粒,pET,22b,coli,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,离子交换层析,层析纯化,HPLC,blot,免疫活性,腹腔注射,BALB,致病力,抗体效价,中和抗体,活性检测,双酶,白相,相对分子质量,减毒,高纯度,重组抗原
AB值：
0.291525
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