典型文献
呈现新型冠状病毒RBD抗原病毒样颗粒的表达与鉴定
文献摘要：
目的:以乙型肝炎病毒核心抗原HBcAg为载体,构建呈现新冠病毒刺突蛋白受体结合域的病毒样颗粒,并鉴定其免疫原性,为新冠病毒疫苗的开发提供新思路.方法:在乙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸编码序列第78和81位插入新冠病毒刺突蛋白受体结合域(RBD),并通过柔性linker(G4S)3进行连接,序列优化后将融合基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化表达菌Rosetta,在自诱导培养基中诱导表达,菌体破碎后经蔗糖密度梯度离心,透析浓缩的方法纯化病毒样颗粒.SDS-PAGE、Western blot、透射电子显微镜检测和鉴定VLPs.将制备的VLPs与佐剂等比例混合经皮下免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中特异性抗体,分析该HBc-RBD VLPs的免疫原性.结果:在自诱导培养基中,大肠埃希菌可表达部分可溶的VLPs,经蔗糖密度梯度离心纯化后在透射电子显微镜下可以观察到病毒样颗粒的存在.动物实验表明HBc-RBD VLPs刺激小鼠产生了特异性抗体.结论:在原核表达系统中成功表达了展示RBD抗原的VLPs,并通过小鼠实验初步验证了免疫原性,为新冠病毒疫苗的研发提供了新方向.
文献关键词：
病毒样颗粒;RBD抗原;乙肝核心抗原;免疫原性
中图分类号：
作者姓名：
卢卉双;马家秀;金佳佩;张津;李亚兰;蔡雪飞
作者机构：
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 重庆 400016
文献出处：
引用格式：
[1]卢卉双;马家秀;金佳佩;张津;李亚兰;蔡雪飞-.呈现新型冠状病毒RBD抗原病毒样颗粒的表达与鉴定)[J].中国生物工程杂志,2022(05):117-123
A类：
G4S,密度梯度离心纯化
B类：
RBD,病毒样颗粒,HBcAg,毒刺,刺突蛋白,受体结合域,免疫原性,新冠病毒疫苗,乙型肝炎病毒核心蛋白,编码序列,过柔,linker,序列优化,融合基因,基因克隆,原核表达载体,pET,28a,Rosetta,自诱导,诱导培养基,诱导表达,菌体,蔗糖,SDS,PAGE,blot,透射电子显微镜,显微镜检测,VLPs,佐剂,等比例,BALB,小鼠血清,特异性抗体,大肠埃希菌,显微镜下,动物实验,表达系统,乙肝核心抗原
AB值：
0.277621
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