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人源诺如病毒GII.3[P12]型病毒样颗粒的免疫原性及受体结合能力
文献摘要：
目的:制备GII.3[P12]型人源诺如病毒(human norovirus, HuNoV)广州株GZ2013-L20的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)和多克隆抗体，系统表征其免疫原性特征和受体结合能力，为HuNoV防控提供数据支撑。方法:以GZ2013-L20毒株基因组为模板，扩增ORF2并构建重组转座载体，转化至大肠埃希菌
DH10
Bac获得重组杆状病毒质粒Bacmid-L20-ORF2，在昆虫细胞sf9中表达目的VLP，采用透射电镜、SDS-PAGE、Western blot(WB)和受体结合实验等方法对纯化后VLP进行鉴定。此外，将VLP免疫小鼠获得多克隆抗体，通过间接ELISA和受体结合阻断试验进行评价。
结果:构建了重组杆状病毒Bacmid-L20-ORF2，并成功获得目的毒株VLP；透射电镜显示颗粒直径约为30 nm；SDS-PAGE和WB结果显示蛋白相对分子质量(Mr. ×10
3)约58；受体结合实验表明，目的VLP与分泌型唾液受体(A型、B型、AB型和O型)、O型非分泌型唾液受体以及猪胃黏蛋白均能有效结合；VLP多克隆抗体效价达到2×10
5，且与20种(20/28)基因型HuNoV的衣壳蛋白具有交叉免疫反应；受体结合阻断实验显示，多克隆抗体仅对同型VLP具有中和阻断效果，而对GII.2、GII.4、GII.8和GII.17等基因型VLP没有中和作用。
结论:GII.3[P12]型HuNoV广州株VLP与分泌型和非分泌型唾液受体均呈现较强的结合能力，其多克隆抗体具有免疫结合广谱性，但中和阻断效果仅对同型病毒有效，其结果为疫苗研发的理性设计提供基础数据。
文献关键词：
人源诺如病毒;GII.3[P12];病毒样颗粒;多克隆抗体;受体结合功能;免疫原性
中图分类号：
作者姓名：
王林平;高珺珊;薛亮;王大鹏;梁燕惠;洪晓静;张菊梅;吴清平
作者机构：
喀什大学生命与地理科学学院 新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室，喀什 844000;广东省科学院微生物研究所 广东省科学院 华南应用微生物国家重点实验 广东省微生物安全与健康重点实验室 农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室，广州 510070;上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系，上海 200240
文献出处：
引用格式：
[1]王林平;高珺珊;薛亮;王大鹏;梁燕惠;洪晓静;张菊梅;吴清平-.人源诺如病毒GII.3[P12]型病毒样颗粒的免疫原性及受体结合能力)[J].中华实验和临床病毒学杂志,2022(05):514-520
A类：
人源诺如病毒,HuNoV,GZ2013,DH10
,受体结合功能
B类：
GII,P12,病毒样颗粒,免疫原性,结合能,human,norovirus,L20,like,particle,VLP,多克隆抗体,毒株,ORF2,转座,大肠埃希菌,重组杆状病毒,病毒质,质粒,Bacmid,昆虫细胞,sf9,透射电镜,SDS,PAGE,blot,WB,颗粒直径,直径约,白相,相对分子质量,Mr,唾液,AB,非分,黏蛋白,有效结合,抗体效价,基因型,衣壳蛋白,交叉免疫,免疫反应,中和作用,广谱性,疫苗研发,理性设计
AB值：
0.243663
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