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典型文献
堆型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的制备及其免疫效果评价
文献摘要:
目的 制备堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)重组亚单位疫苗,并评价其免疫效果.方法 将堆型艾美耳球虫的保护性抗原基因cSZ1克隆至酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-cSZ1,转化毕赤酵母菌株GS115,构建重组菌GS115-pPICZαA-cSZ1,经甲醇诱导表达重组蛋白cSZ1.按20、40、60 μg/只(低、中、高剂量)经雏鸡肌肉注射重组蛋白,7d后进行加强免疫,加强免疫7d后经口感染E.acervulina孢子化卵囊,剂量为1×104个/只,同时设阳性对照组(未免疫仅攻虫)和阴性对照组(未免疫未攻虫).攻虫后7 d检测雏鸡的抗球虫指数(anti-coccidial index,ACI);初次免疫后7 d及加强免疫后7 d,经雏鸡心脏采血,分离血清,间接ELISA法检测血清抗体水平;攻虫后7 d,无菌取雏鸡脾脏,CCK-8法检测T淋巴细胞增殖情况.结果 经双酶切及测序鉴定,证明重组表达质粒构建正确;经菌落PCR及测序鉴定,证明重组菌构建正确.重组蛋白cSZ1的相对分子质量约19 000,可与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合.低、中、高剂量免疫组的ACI分别为171.25、176.42、174.33;与阴性对照组比较,低、中、高剂量免疫组雏鸡于初次免疫后7 d及加强免疫后7 d,血清抗体水平明显升高(P<0.01),攻虫后7 d,T淋巴细胞增殖率显著升高(P<0.01).结论 制备的堆型艾美耳球虫重组亚单位疫苗对雏鸡有较好的免疫效果.
文献关键词:
堆型艾美耳球虫;cSZ1基因;毕赤酵母;重组蛋白;免疫保护
作者姓名:
毕天奇;肇英池;马丹;程淑琴;王晓岑;李新;李建华;张西臣;宫鹏涛;张楠;张媛媛
作者机构:
吉林大学动物医学学院,吉林长春130062;吉林大学人兽共患病研究所,吉林长春130062
引用格式:
[1]毕天奇;肇英池;马丹;程淑琴;王晓岑;李新;李建华;张西臣;宫鹏涛;张楠;张媛媛-.堆型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的制备及其免疫效果评价)[J].中国生物制品学杂志,2022(07):790-794,801
A类:
堆型艾美耳球虫,acervulina,cSZ1,coccidial
B类:
重组亚单位疫苗,免疫效果评价,Eimeria,保护性抗原,原基,酵母表达,表达载体,pPICZ,重组表达,毕赤酵母,酵母菌株,GS115,甲醇诱导,诱导表达,重组蛋白,高剂量,雏鸡,肌肉注射,7d,加强免疫,经口,孢子,卵囊,阳性对照,未免,anti,ACI,鸡心,采血,血清抗体水平,无菌,脾脏,CCK,淋巴细胞增殖,双酶,质粒构建,菌落,相对分子质量,His,签单,单克隆抗体,特异性结合,细胞增殖率,免疫保护
AB值:
0.261631
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