典型文献
严重急性呼吸综合征冠状病毒2核衣壳蛋白的制备及其初步应用
文献摘要:
目的 在大肠埃希菌中表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N蛋白),并进行纯化,用于制备SARS-CoV-2检测试剂.方法 将含N蛋白基因的重组质粒pET28a转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达N蛋白,考察Ni柱亲和层析与SP强阳离子交换层析和CM弱阳离子交换层析对重组N蛋白的纯化效率,制备胶体金免疫检测试剂并检测灭活血清.结果 表达的重组N蛋白相对分子质量约49 000,表达量约占包涵体总蛋白的30%.Ni2+亲和层析对重组N蛋白的选择性较低,通过强阳离子交换与弱阳离子交换两步层析,实现了重组N蛋白在色谱柱上的复性和纯化,纯度大于90%.以此制备的免疫胶体金检测试剂可初步用于血清中相应抗体的检测.结论 复性后的重组N蛋白,具有较好的生物活性,可用于诊断试剂开发,复性工艺对其他重组蛋白质的纯化具有借鉴意义.
文献关键词:
严重急性呼吸综合征冠状病毒2;核衣壳蛋白;包涵体;复性;纯化;免疫胶体金检测试剂
中图分类号:
作者姓名:
李光;任仲;胡道奇;刘汨;李克强;张玉玲;周松辉;方晓兰;李卫平;滕淑静
作者机构:
岳阳职业技术学院,湖南岳阳414000;湖南康润药业股份有限公司,湖南岳阳414000;免疫诊断试剂湖南省工程研究中心,湖南岳阳414000
文献出处:
引用格式:
[1]李光;任仲;胡道奇;刘汨;李克强;张玉玲;周松辉;方晓兰;李卫平;滕淑静-.严重急性呼吸综合征冠状病毒2核衣壳蛋白的制备及其初步应用)[J].中国生物制品学杂志,2022(02):184-188
A类:
免疫胶体金检测试剂
B类:
严重急性呼吸综合征冠状病毒,核衣壳蛋白,初步应用,大肠埃希菌,severe,acute,respiratory,syndrome,coronavirus,SARS,CoV,nucleocapsid,protein,重组质粒,pET28a,化感,感受态,BL21,DE3,诱导表达,亲和层析,SP,阳离子交换,离子交换层析,CM,蛋白的纯化,免疫检测,灭活,活血,白相,相对分子质量,包涵体,体总,总蛋白,Ni2+,两步,色谱柱,诊断试剂,重组蛋白
AB值:
0.306128
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