典型文献
新型冠状病毒重组抗原制备、纯化及鉴定
文献摘要:
目的 制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的刺突蛋白(S)和核衣壳蛋白(N)重组抗原.方法 利用Blast程序检索目标序列SARS-CoV-2的S蛋白和N蛋白的同源序列,用SWISS-MODEL软件对目标序列进行结构建模,运用DISCO TOPE对S蛋白和N蛋白的B细胞抗原表位进行分析,选取抗原表位较多的序列进行合成;重组抗原分离纯化后制备兔抗新冠病毒蛋白多抗,用Western blot检测抗原SARS-CoV-2的S蛋白以及N蛋白免疫学活性;用ELISA法检测自制抗原与市售抗体的结合能力.结果 重组质粒pET-22b-SA、pET-22b-SB、pET-22b-SC、pET-22b-NA、pET-22b-NB测序鉴定结果显示正确;Western blot结果显示,重组抗原与山羊抗兔IgG-HRP有特异性结合反应,表明具有良好的免疫学反应;ELISA法结果显示,重组抗原结合能力明显强于市售抗N蛋白抗原.结论 制备的抗原与不同靶IgG和IgM结合能力强,特异性高,具有开发成检测血清SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体的试剂盒的潜力.
文献关键词:
新型冠状病毒;刺突蛋白;核衣壳蛋白;B细胞表位预测;同源性分析
中图分类号:
作者姓名:
范能全;张玲;任学毅;杨辉;杨黎;范开;彭兰
作者机构:
401121 重庆市食品药品检验检测研究院;401331 重庆派金生物科技有限公司;401331 重庆医药高等专科学校基础部
文献出处:
引用格式:
[1]范能全;张玲;任学毅;杨辉;杨黎;范开;彭兰-.新型冠状病毒重组抗原制备、纯化及鉴定)[J].中国医药生物技术,2022(05):385-392
A类:
TOPE
B类:
病毒重组,重组抗原,SARS,CoV,刺突蛋白,核衣壳蛋白,Blast,目标序列,SWISS,MODEL,结构建模,DISCO,抗原表位,分离纯化,新冠病毒,病毒蛋白,多抗,blot,免疫学,市售,结合能,重组质粒,pET,22b,SB,NA,NB,山羊,IgG,HRP,特异性结合,抗原结合,IgM,发成,试剂盒,细胞表位,表位预测,同源性分析
AB值:
0.331217
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