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谷氨酸脱氢酶与醇脱氢酶的共表达及其在制备(R)-2-氯-1-苯乙醇中的应用
文献摘要：
[背景]醇脱氢酶AdhS能催化不对称还原反应制备(R)-2-氯-1-苯乙醇,但由于自身再生辅酶NADH的能力不足,需要辅酶再生酶协助其再生NADH.谷氨酸脱氢酶能以谷氨酸为底物,再生辅酶NAD(P)H,具有辅酶再生酶的潜力.[目的]克隆表达谷氨酸脱氢酶基因gdhA,构建谷氨酸脱氢酶GdhA与醇脱氢酶AdhS的大肠杆菌共表达体系,提高AdhS制备(R)-2-氯-1-苯乙醇的转化效率.[方法]从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)168中克隆基因gdhA,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,分析辅酶再生活力;再与醇脱氢酶AdhS共表达,优化表达条件;分析不同辅酶再生方案对制备(R)-2-氯-1-苯乙醇的转化效率的影响.[结果]谷氨酸脱氢酶GdhA再生NADH的比活力为694 U/g.经GdhA与AdhS的共表达及表达条件优化后,制备(R)-2-氯-1-苯乙醇的转化效率达465 U/L.经比较,GdhA协助再生辅酶NADH,可使AdhS制备(R)-2-氯-1-苯乙醇的转化效率提高到约3倍.[结论]谷氨酸脱氢酶GdhA为NADH高效再生酶,与醇脱氢酶AdhS共表达可显著提高AdhS制备(R)-2-氯-1-苯乙醇的转化效率.
文献关键词：
谷氨酸脱氢酶;醇脱氢酶;共表达;(R)-2-氯-1-苯乙醇;NADH
中图分类号：
作者姓名：
陈少云;李宏燕
作者机构：
浙江中医药大学生命科学学院,浙江杭州310053
文献出处：
引用格式：
[1]陈少云;李宏燕-.谷氨酸脱氢酶与醇脱氢酶的共表达及其在制备(R)-2-氯-1-苯乙醇中的应用)[J].微生物学通报,2022(06):2062-2075
A类：
AdhS,gdhA,Bacillussubtilis
B类：
谷氨酸脱氢酶,醇脱氢酶,共表达,苯乙,催化不对称,不对称还原,还原反应,应制,NADH,辅酶再生,底物,克隆表达,酶基因,GdhA,大肠杆菌,表达体系,转化效率,枯草芽孢杆菌,Escherichia,coli,BL21,DE3,生活力,比活力,表达条件优化,效率提高,高效再生
AB值：
0.192943
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