典型文献
保加利亚乳杆菌ATCC11842 L-乳酸脱氢酶同工酶基因的克隆与表达分析
文献摘要：
通过对保加利亚乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)L-乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogen-ase,L-LDH)同工酶基因的异源表达、酶活测定和摇瓶发酵研究L-LDH在乳酸合成中的作用.将保加利亚乳杆菌ATCC11842中L-乳酸脱氢酶基因ldb0120和ldb0094分别克隆至载体pET28a(+)中,构建重组表达载体pET28aldb0120和pET28aldb0094,并转化到大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行表达.进一步对重组蛋白进行Ni-NTA柱亲和层析和酶学活性测定,结果显示,LDB0120和LDB0094的比活力分别为0和25 U/mg,表明LDB0094是具有低活性的L-乳酸脱氢酶,而LDB0120不具有活性.对两株重组菌分别进行好氧和微好氧发酵,重组菌E.coli BL21/pET28aldb0094在好氧和微好氧条件可以合成L-乳酸,浓度分别为41.9和227.9 mg/L,而菌株E.coli BL21/pET28aldb0120在两种培养条件下均基本不合成L-乳酸,推测保加利亚乳杆菌中L-乳酸脱氢酶LDB0094为催化L-乳酸合成的关键酶.首次对保加利亚乳杆菌的L-乳酸脱氢酶同工酶基因进行研究,通过基因异源表达、蛋白纯化、酶活测定和摇瓶发酵,揭示Ldb0094酶为保加利亚乳杆菌ATCC11842中催化L-乳酸合成的关键酶.
文献关键词：
保加利亚乳杆菌ATCC11842;L-乳酸脱氢酶同工酶;L-乳酸;基因克隆表达;L-LDH(乳酸脱氢酶)酶活
中图分类号：
作者姓名：
黄艳娜;王金斌;王赛赛;段赛菲;周茂超;唐雪明
作者机构：
上海市农业科学院生物技术研究所,上海 201106
文献出处：
引用格式：
[1]黄艳娜;王金斌;王赛赛;段赛菲;周茂超;唐雪明-.保加利亚乳杆菌ATCC11842 L-乳酸脱氢酶同工酶基因的克隆与表达分析)[J].微生物学杂志,2022(05):12-18
A类：
ATCC11842,ldb0120,ldb0094,pET28aldb0120,pET28aldb0094,LDB0120,LDB0094,Ldb0094
B类：
保加利亚乳杆菌,乳酸脱氢酶同工酶,酶基因,克隆与表达,表达分析,Lactobacillus,delbrueckii,subsp,bulgaricus,lactate,dehydrogen,ase,LDH,异源表达,酶活测定,摇瓶发酵,别克,重组表达,表达载体,大肠埃希菌,Escherichia,coli,BL21,DE3,重组蛋白,NTA,亲和层析,酶学活性,活性测定,比活力,低活性,两株,株重,好氧发酵,好氧条件,培养条件,关键酶,蛋白纯化,基因克隆表达
AB值：
0.240537
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