典型文献
1种植物瞬时表达捻转血矛线虫氨基肽酶基因和Hc23基因方法的建立
文献摘要：
为建立利用植物细胞瞬时表达反刍动物寄生线虫捻转血矛线虫优势抗原的方法,选取了氨基肽酶基因Hc-ap-10和优选抗原分子基因Hc23作为目标基因,将经过密码子优化的Hc-ap-10(AP10op)和Hc 23分别插入pH71ic-EGFP表达载体并在N、C两端均 添加核定位信号(nuclear localization sequence,NLS),使用电 转法将pH7dNLSAP 10op和pH7dNLSHc23分别转入GV3101根癌农杆菌中,随后将根癌农杆菌悬液侵染本氏烟草,最后通过荧光显微镜观察目标蛋白定位情况,并提取侵染烟草叶片总蛋白,使用Western blot检测蛋白的表达量.结果显示,成功构建了植物双元表达载体pH7dNLSAP10op和pH7dNLSHc23,荧光显微镜观察发现在目的基因N、C两端添加了核定位信号后的质粒转化根癌农杆菌.该方法外源表达的膜蛋白pH7dNLSAP10op和pH7dNLSHc23都成功表达在本氏烟草叶片的细胞核上,Western blot也成功检测到Hc23和AP10op蛋白,且Hc23蛋白的表达水平相对较高.结果 表明,添加了核定位信号能成功将目的蛋白表达在植物细胞核上;密码子优化有利于大分子蛋白的高效表达,但对于一些相对分子质量相对较小的蛋白可能是非必要的.该研究成功将2种抗原分子表达在植物细胞中,为后续疫苗的研究奠定了基础.
文献关键词：
瞬时表达;捻转血矛线虫;氨基肽酶;Hc23基因;核定位信号;根癌农杆菌;本氏烟草
中图分类号：
作者姓名：
叶莉莎;张挺;廖聪;李婷婷;田振东;胡敏
作者机构：
华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉430070;华中农业大学农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室,湖北武汉430070
文献出处：
引用格式：
[1]叶莉莎;张挺;廖聪;李婷婷;田振东;胡敏-.1种植物瞬时表达捻转血矛线虫氨基肽酶基因和Hc23基因方法的建立)[J].中国兽医学报,2022(12):2420-2426
A类：
Hc23,AP10op,pH71ic,pH7dNLSAP,10op,pH7dNLSHc23,pH7dNLSAP10op
B类：
瞬时表达,捻转血矛线虫,氨基肽酶,酶基因,植物细胞,反刍动物,寄生,ap,分子基因,过密,密码子优化,EGFP,核定位信号,nuclear,localization,sequence,转法,转入,GV3101,根癌农杆菌,菌悬液,侵染,本氏烟草,荧光显微镜观察,蛋白定位,草叶,总蛋白,blot,双元表达载体,观察发现,目的基因,质粒,外源表达,膜蛋白,细胞核,目的蛋白,大分子,高效表达,相对分子质量,非必要
AB值：
0.240584
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
