典型文献
木薯MeAHL19的互作蛋白筛选及鉴定
文献摘要：
AT-hook核定位蛋白(AT-hook motif nuclear localized protein,AHL)是一类具有AT-hook基序的核定位蛋白,在植物生长发育过程中起着重要的调控作用.为探究木薯(Manihot esculenta)AHL家族成员MeAHL19的生物学功能以及其在蛋白互作网络中的作用.本研究采用T4连接法构建诱饵载体pGBKT7-MeAHL19,利用酵母(Saccharomyces cerevisiae)双杂交技术(yeast two-hybrid,Y2H)在木薯cDNA文库中筛选MeAHL19的互作蛋白,采用实时荧光定量PCR技术分析MeAHL19及其互作蛋白的基因表达模式.结果显示:酵母双杂交筛库获得20个阳性克隆,经PCR扩增并测序比对后鉴定出8个候选互作蛋白,Y2H回转验证发现,MeAHL19蛋白与核酮糖二磷酸羧化酶小链(ribulose bisphosphate carboxylase small chain,RBCS)蛋白可在体外互作;双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)实验进一步验证了MeAHL19与RBCS在本氏烟草(Nocotinan benthamiana)叶肉细胞中发生互作.基因表达模式分析表明,MeAHL19主要在根中表达,而RBCS在根、茎和叶中的表达水平基本一致;MeAHL19与RBCS在木薯中共同响应非生物胁迫和外源激素应答.本研究为进一步探究MeAHL19在木薯逆境响应过程中的生物学功能提供了科学参考.
文献关键词：
木薯;木薯AT-hook核定位蛋白19(MeAHL19);酵母双杂交;互作蛋白;双分子荧光互补
中图分类号：
作者姓名：
张建禹;王晓彤;耿沙;毋志浩;任思杨;李瑞梅;姚远;郭建春;刘姣;胡新文
作者机构：
海南大学生命科学学院,海口570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院,海口571101;海南大学热带作物学院,海口570228
文献出处：
引用格式：
[1]张建禹;王晓彤;耿沙;毋志浩;任思杨;李瑞梅;姚远;郭建春;刘姣;胡新文-.木薯MeAHL19的互作蛋白筛选及鉴定)[J].农业生物技术学报,2022(08):1454-1467
A类：
MeAHL19,Nocotinan
B类：
木薯,互作蛋白筛选,AT,hook,核定,motif,nuclear,localized,protein,基序,植物生长发育,Manihot,esculenta,生物学功能,蛋白互作网络,T4,接法,诱饵载体,pGBKT7,Saccharomyces,cerevisiae,杂交技术,yeast,two,hybrid,Y2H,cDNA,文库,基因表达模式,酵母双杂交,回转,二磷酸,羧化酶,ribulose,bisphosphate,carboxylase,small,chain,RBCS,双分子荧光互补,bimolecular,fluorescence,complementation,BiFC,本氏烟草,benthamiana,叶肉细胞,表达模式分析,非生物胁迫,外源激素,激素应答,逆境响应,响应过程
AB值：
0.351943
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